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gaoqian8717

金虫 (小有名气)

[求助] 孢子斜面存放于4°冰箱,影响大吗?

我把在培养箱中培养7天的新鲜的孢子斜面存放于4°冰箱,隔一段时间(不超过一个月,也就7-20天吧)再制取孢子悬液接种进行发酵实验;这和直接拿新鲜孢子斜面做发酵实验相比,可能会影响到孢子萌发率。但是有谁知道影响大吗?比如我拿曲霉发酵生产有机酸,除了斜面新鲜程度不一样外,其他都一样,对生产目的产物的产量影响大吗?
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wgy2007

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

gaoqian8717(金币+2): 2011-09-09 15:58:10
gaoqian8717(金币+3): 2011-09-10 19:30:07
我也是做曲霉发酵生产蛋白酶的,一般是克氏瓶斜面种子培养好以后放冷藏冰箱备用,不超过一个月,最长的放了一个半月,超过一个月的种子接种种子罐长的会慢一些,培养时间延长5~6个小时,接种发酵罐后对发酵产物影响不大,基本一样。一个月以内是没有问题的。但不知道你的菌种怎么样,可以做实验试一下。
2楼2011-09-09 15:55:50
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gaoqian8717

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wgy2007 at 2011-09-09 15:55:50:
我也是做曲霉发酵生产蛋白酶的,一般是克氏瓶斜面种子培养好以后放冷藏冰箱备用,不超过一个月,最长的放了一个半月,超过一个月的种子接种种子罐长的会慢一些,培养时间延长5~6个小时,接种发酵罐后对发酵产物影 ...

谢谢你,我是用除了孢子新鲜度不一样以外,其他都一样的斜面制作孢子悬液,充分打散且过滤除菌丝了,用OD560分光光度计测定悬液的浓度后,比如我选择OD560=0.7这个浓度接种,做了几次,发现重复性很差,前一次长处菌球,后一次又是很稠密的菌丝体,这应该是孢子接种量不一样或者孢子量差不多但是萌发率不一样所致。但是不明白为什么会出现这种情况,很困惑。

每次操作都是一样的,除了孢子新鲜度不一样以外。
3楼2011-09-09 16:04:47
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xhg207

金虫 (正式写手)

短期内没有问题!我做喜温菌,4度保存半年,仍然产目标酶。
4楼2011-09-09 16:52:08
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sdmissing

铁虫 (小有名气)

4℃储藏时间不同,斜面孢子的活力大小 不一样的,所以即使是同样的接种量也会出现楼主所说的重复性差的问题
5楼2012-03-13 10:56:12
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puresnowlqin

金虫 (小有名气)

多少会有影响的,影响大不大还要看具体品种的,哈哈。。。只有对比后才有发言权。。。我都是一批做出很多孢子悬液甘油冻起来,感觉很方便的,哈哈。。。By the way,你是怎么过滤除菌丝的呢?
最喜欢的就是最好的。
6楼2013-08-22 16:36:33
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小小虫^_^

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by puresnowlqin at 2013-08-22 16:36:33
多少会有影响的,影响大不大还要看具体品种的,哈哈。。。只有对比后才有发言权。。。我都是一批做出很多孢子悬液甘油冻起来,感觉很方便的,哈哈。。。By the way,你是怎么过滤除菌丝的呢?

你好,我对你这个孢子悬液甘油冻起来的方法很感兴趣,你能说的详细一点吗,使用的时候是怎么用的,有什么注意的地方 ?
我是把8层纱布放在漏斗上然后过滤菌丝的。
7楼2017-03-12 14:21:16
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