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aniu.85

银虫 (正式写手)

[求助] BSA荧光蓝移的原因

通过改变BSA的PH环境，发现荧光有蓝移，怎么才能更准确的解释？通常说是BSA的微环境的疏水性增大导致的（谁能解释下原理吗？）是蛋白质结构紧凑增加了共振能的传递吗，但是我认为这样不会导致蓝移。。。。
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1楼 2011-09-08 10:39:44
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sally208

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
xjajx(金币+1): 鼓励有价值回复 2011-09-08 17:13:15
荧光团的发射峰的位置和其所处的微环境有关， 改变溶液的pH值会影响到BSA的构象，进而影响到色氨酸基团附近的微环境，蓝移则表明其附近区域的的极性降低。
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3楼2011-09-08 14:44:45
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aniu.85

银虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by sally208 at 2011-09-08 14:44:45:
荧光团的发射峰的位置和其所处的微环境有关， 改变溶液的pH值会影响到BSA的构象，进而影响到色氨酸基团附近的微环境，蓝移则表明其附近区域的的极性降低。

具体怎么影响构象的呢？或者说是色氨酸的某个集团发生了什么变化？微环境发生变化，换个意思是不是说这个荧光的峰是它周围环境的荧光峰呢？谢谢解答
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4楼2011-09-08 19:33:22
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sally208

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
yingli09(金币+2): 谢谢参与！ 2011-09-08 20:16:30
aniu.85(金币+4): 解释的很详细 谢谢你 2011-09-08 20:40:41
引用回帖:
4楼: Originally posted by aniu.85 at 2011-09-08 12:33:22:
具体怎么影响构象的呢？或者说是色氨酸的某个集团发生了什么变化？微环境发生变化，换个意思是不是说这个荧光的峰是它周围环境的荧光峰呢？谢谢解答

BSA的荧光主要是来自于色氨酸的荧光发射。在不同pH值下，BSA的二级结构会不一样，直接影响到色氨酸周围的其它氨基酸的空间排布和相互间作用的变化。而荧光团的发射特性是会受到其环境的极性的影响的，因此上述变化会最终引起色氨酸的发射峰的移动。
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5楼2011-09-08 19:48:43
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郑成志

金虫 (正式写手)
具体可参考 Principles of Fluorescence 很经典的教材，微环境极性降低，溶剂分子极化率减小，斯托克斯位移减小，导致荧光峰蓝移。不知我说对不，大家共同探讨！
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6楼2012-08-31 22:31:09
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