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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 双酶切请教
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madengyu

禁虫 (小有名气)
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薇仔

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1楼 2011-09-02 16:08:50
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xbl3688

银虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yesucao at 2011-09-02 16:49:20:
可以一块儿切，两种酶的最适反应温度都是37度，一起切的时候温度设置为37度，使用通用型的缓冲液 1*M
酶切体系：
质粒2-3微升，缓冲液2微升，两种酶各0.5微升 加灭菌双蒸水定容至20微升

学习了！
回复此楼
生活的乐趣在于善于发现美，学会欣赏美
3楼2011-09-02 22:38:25
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yesucao

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
madengyu(金币+2): 2011-09-02 17:54:17
dhd997(金币+3): good 2011-09-02 18:21:23
可以一块儿切，两种酶的最适反应温度都是37度，一起切的时候温度设置为37度，使用通用型的缓冲液 1*M
酶切体系：
质粒2-3微升，缓冲液2微升，两种酶各0.5微升 加灭菌双蒸水定容至20微升
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2楼2011-09-02 16:49:20
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loveskyzhou

铁虫 (正式写手)
★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-09-03 12:57:40
自己提的质粒量不高的话不加水也罢，可以直接吧dd水那部分用质粒代替，否则可能质粒量过小（当然如果是测好浓度的除外）。
我们用fermentas的酶，在他的网址上有一种计算器，输入你用的两种酶可以计算出来哪一种BUFFER比较好用。
赞一下(1人) 回复此楼
我会绕一个圈，走回到实验室
4楼2011-09-03 07:59:01
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wzqno

金虫 (小有名气)
★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-09-03 12:57:55
你的通用双酶切buffer是1*M buffer
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5楼2011-09-03 09:42:34
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