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wz-louis

银虫 (小有名气)

[交流] 大家都用什么方法提取植物DNA 已有15人参与

大家都用什么方法提取植物DNA ,有没有实用省时快捷的,最简易的方法啊!
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笑面人生
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kidluag

金虫 (正式写手)

不自信的师生


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具体方法参上       
1)2~3片真叶时剪取新鲜幼嫩叶片,取0.5g放入预冷的研钵中,在液氮冷冻下迅速将叶片研磨成粉末状,然后立即将叶片粉末转入到2µl离心管中,每管约0.1g。
        2)向离心管中加入600ul 65℃预热的CTAB提取液,剧烈震荡混匀,65℃水浴1h。
        3)冷至室温后加入等体积的24:1的氯仿/异戊醇,轻轻摇匀至溶液呈乳浊液,20℃ 10000rpm 离心10min。
        4)用剪去的枪头将上清液缓缓转移到盛有2/3体积预冷异丙醇的1.5µl离心管中,-20℃沉淀2h以上。
        5)4℃ 10000rpm离心5min,去上清液,用70%乙醇洗涤1~2次,每次离心5min,超净工作台上吹干。
        6)用150 ul无菌水,1.5µlRNAase溶解,用手指弹,60℃水浴中加热10分钟,可室温放置过夜,如现用,也可放-20℃长久保存。
        7)琼脂糖电泳和紫外分光光度计检测纯度及浓度。
被迫的无知小小博
16楼2012-02-22 04:26:41
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wanhscn

木虫 (职业作家)

哲学@草根

★ ★ ★
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adslye(金币+2): 正解! 2011-08-30 10:45:34
要求不高的可以用NaOH法
一般PCR,用的是SDS法
要求高点了可以用CTAB法
真相是最大的奢侈品
2楼2011-08-29 21:56:27
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虫虫博士

新虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
adslye(金币+2): 鼓励新虫发帖! 2011-08-30 10:45:54
引用回帖:
2楼: Originally posted by wanhscn at 2011-08-29 21:56:27:
要求不高的可以用NaOH法
一般PCR,用的是SDS法
要求高点了可以用CTAB法

NaOH法是不是加入碱,直接煮沸几分钟,然后取上清直接PCR?

这种方法适用于SSR之类的扩增,不知道DNA电泳能不能看到条带?
3楼2011-08-30 09:07:22
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yqlmshui

禁虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
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4楼2011-08-30 16:25:56
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