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bassming

[交流] 工程菌发酵

重组工程菌的生理性状稳定吗?
能够确定相对稳定的发酵工艺吗?
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gene121

木虫 (著名写手)

生长过程中质粒的外源基因的表达带来的压力导致的遗传不稳定性历来为基因工程菌发酵的难点。实验室通常采用诱导型表达体系将重组菌生长与表达分离,降低外源基因在重组菌生长阶段的表达量,减轻宿主生长的压力;但诱导表达体系往往需要添加IPTG或乳糖等昂贵的诱导剂,难以适应工业化的需求。组成型表达体系则无需诱导,在工业生产方面具有较强的优势。但外源基因在菌体生长时的高表达导致的不稳定性是该体系的缺点,实验室一般通过质粒与宿主之间适应性的筛选,施加选择性压力等方法改善。但在工业生产中,添加抗生素造成成本增加,也会影响最终产品质量。而重组菌的培养条件,如培养基组成,培养温度及细菌比生长速率等对外源基因的稳定性、表达及菌体生长均有较大影响。因此通过发酵条件优化,改善重组菌的生长环境是优化组成型表达体系采用的有效途径。
3楼2006-11-13 10:19:29
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守候青鸟

银虫 (小有名气)

俺也正在做这方面的,那位大虾指教一二
奋斗目标:农妇、衫全、有点田......
2楼2006-11-11 08:50:58
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suger_fan

木虫 (正式写手)

虫坛啄木鸟

偶个人觉得重组菌的生理形状谈不上稳定,要长期稳定表达很不现实,最好把构建好的质粒备份,一旦工程菌种出现不稳定可以重新转化,否则长期使用或保藏的工程菌种或多或少都要出问题啊!!!
宠辱不惊,笑看堂前花开花落;去留无意,漫随天外云卷云舒。
4楼2006-11-22 10:40:44
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