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yesucao

木虫 (正式写手)

[求助] 植物激素的测定方法

有用过酶联免疫试剂盒测定植物中的茉莉酸JA 水杨酸SA 乙烯ETH 含量的吗,请问这些激素是怎么从样品中提取的,就是按照说明书上面的用PBS缓冲液研磨然后离心提取上清液,还是有什么其他的方法,说明书上的方法能把激素都提取出来吗,还有酶标板是一次性的吗,封板膜是 一次性的,那酶标板是怎么清洗的。
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tanguoqin

新虫 (初入文坛)

激素提取
1.准确称量约1 g新鲜植物样品,于液氮中研磨至粉碎;
2.向粉末中加入10 ml异丙醇/盐酸提取缓冲液,4 ℃震荡30 min;
3.加入20 ml二氯甲烷,4 ℃震荡30 min;
4.4 ℃,13000  rpm离心5 min,取下层有机相;
5.避光,以氮气吹干有机相,以400 μl甲醇(0.1%甲酸)溶解;
6.过0.22 μm滤膜,进HPLC-MS/MS检测。

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诚信笃实,钟鼎之志
17楼2017-06-15 11:48:17
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Crescendo

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
yesucao(金币+3): 2011-08-10 10:43:05
dhd997(金币+2): good 2011-08-10 12:12:54
我之前用ELIAS测过IAA,IAA提取方法参考文献的,因为我买的试剂盒没有提取方法。
酶标板可重复利用,用酶标板清洗仪清洗。
不过,由于ELIAS方法测定植物激素很不稳定,试剂盒差异也很大,所以现在这种测定方法难以被广泛接受,一般采用色谱。
日拱一卒,功不唐捐
2楼2011-08-10 10:22:06
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yesucao

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Crescendo at 2011-08-10 10:22:06:
我之前用ELIAS测过IAA,IAA提取方法参考文献的,因为我买的试剂盒没有提取方法。
酶标板可重复利用,用酶标板清洗仪清洗。
不过,由于ELIAS方法测定植物激素很不稳定,试剂盒差异也很大,所以现在这种测定方法难 ...

你提取的方法是按照文献,但是很多文献提取之后都是做高效液相的哦,你也是按照提取之后测高效的方法提取的吗,谢谢
3楼2011-08-10 10:45:09
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Crescendo

铁杆木虫 (著名写手)


1949stone(金币+1): 测浓度还是很准的 2011-08-10 17:04:10
我没做HPLC,不过要是测浓度最好做HPLC——毕竟这个能被承认。我打算做GC-MS,主要想分析IAA的不同形式的浓度。但由于条件所限,还没做;过段时间再做。
日拱一卒,功不唐捐
4楼2011-08-10 10:58:46
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