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hnksc

铁虫 (初入文坛)

目的片段是从质粒上切下来的,载体去磷酸化后按照说明书的方法提纯了。现在仍是没菌生长。
11楼2011-08-03 16:47:48
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w2boluo

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
CIAP处理时间不能过长,最好控制在30分钟以下。紫外测低浓度核酸不准,你这等于没测浓度,还是跑胶靠谱。尤其EcoRI这种星号活性严重的酶,更应该回收了以后电泳定量。
How about the future?
12楼2011-08-03 17:09:52
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hnksc

铁虫 (初入文坛)

CIAP处理时间长了会怎么样?
13楼2011-08-03 17:51:41
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wind20020108

铁虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
比例加到1:8  然后酶加到3微升  16度连接过夜
不知道能说啥
14楼2011-08-25 16:02:25
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hnksc

铁虫 (初入文坛)

还没有成功,试试你的方法。
15楼2011-09-02 09:32:16
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yanshuai511

铜虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
西瓜(金币+2): Good!貌似是酶液里面有甘油,酶的体积大了,甘油的量会影响反应。 2011-09-04 18:47:43
我们一般是目的片段比质粒在1:3到1:10之间的,具体的到没有什么确切的比例。会不会是你酶的体积超过了你反应体积的10%,这样就不行。
16楼2011-09-04 11:07:42
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