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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 大家遇到过PCR假阳性的问题吗？如何解决呢？
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skkyy88888

铜虫 (著名写手)

[交流] 大家遇到过PCR假阳性的问题吗？如何解决呢？ 已有12人参与

如题啊。困惑啊。
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1楼 2011-07-27 10:07:09
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
★ ★ ★
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dhd997(金币+2): good 2011-07-30 13:18:05
我试过把超纯水用0.22微米滤膜过滤后就没假阳性了
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
2楼2011-07-27 10:20:07
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sxxuan

金虫 (著名写手)
★ ★ ★
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dhd997(金币+2): good 2011-07-30 13:18:20
同意楼上。或换一管新的超纯水。
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你的日子如何，你的力量也必如何！
3楼2011-07-27 10:22:08
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mayonghong

铜虫 (初入文坛)
★ ★ ★
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dhd997(金币+2): 可以举例说明一下？ 2011-07-30 13:18:45
PCR出现假阳性是很正常的现象，需要进行多种方法进行验证....
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一生有你
4楼2011-07-27 10:25:20
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12zhangwei

新虫 (小有名气)
★ ★ ★
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dhd997(金币+2): 鼓励经验交流 2011-07-30 13:19:07
你是说挑菌做可克隆吗？假阳性很正常，我一般是先做菌液，后提质粒，确定
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5楼2011-07-27 10:39:35
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qgaoamtf

至尊木虫 (职业作家)
★ ★ ★
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dhd997(金币+2): 有可能吗？ 2011-07-30 13:19:23
引物与模板是否被污染？
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6楼2011-07-27 11:10:07
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qgaoamtf

至尊木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
那就单独做一个只有（或不加）引物或模板的PCR对照看看。
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7楼2011-07-30 14:13:09
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逍遥狂骑

铁虫 (初入文坛)
★
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引物非特异，重新设引物，减少污染，提高退火温度
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8楼2011-07-30 14:47:30
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen
★ ★
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西瓜(金币+1): 鼓励 2011-07-30 23:37:43
没有遇到过。。。一般只要PCR验证能够P出来的，提质粒酶切都正确。。。
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Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
9楼2011-07-30 15:03:48
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jzyzqbx

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
做个空白对照吧，P一下没转过的空白质粒
一般验证方法除了菌液PCR外还可以，提质粒酶切验证
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10楼2011-07-31 09:37:48
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