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戊二醛、多聚甲醛与福尔马林固定原理及用途的区别
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| 进入实验室，看到有的组织用这三种不同的溶液固定，请各位前辈指点指点，这三者固定的原理及用途的区别？谢谢！ |
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【答案】应助回帖
宏伟10(金币+1): 2011-07-31 12:15:49
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甲醛(福尔马林)应用最广 原理：形成分子间的交联，影响蛋白构型而使之固定。 优点：形态结构保存好，且穿透性强，组织收缩少。 缺点： 1甲醛放置过久可氧化为甲酸，使溶液pH降低，影响染色； 2醛基与抗原蛋白的氨基交联形成羧甲基，使抗原决定簇的三维构象出现空间障碍； 3分子间交联形成的网格结构可能部分或完全掩盖某些抗原决定簇，使之不能充分暴露。可造成假阴性的染色结果。 -注意事项： 1缩短固定时间，降低固定温度(4C)，为此组织块不宜过厚。 2改用中性缓冲福尔马林，以pH值7.2～7.4 0.01mol/L的磷酸盐缓冲液配制成10％甲醛固定液，减少固定液pH的变化。 3固定后充分水洗以减少分子间交联。 4切片在作免疫组化染色前，先经预处理使抗原再现(抗原修复)。 戊二醛： 穿透性强，微细结构保存好，但对抗原有一定影响，常与其他固定剂联合用作免疫电镜固定液。 多聚甲醛(常用4%)： 可用于免疫电镜；也可用于免疫荧光染色。 主要检测组织内一些性能娇弱的抗原特别是细胞表面抗原，例如各类淋巴细胸分化决定簇(CD)、主要组织相容性抗原等。 |
2楼2011-07-27 10:48:02
3楼2020-06-05 12:36:19