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宏伟10

银虫 (小有名气)

[求助] 戊二醛、多聚甲醛与福尔马林固定原理及用途的区别

进入实验室,看到有的组织用这三种不同的溶液固定,请各位前辈指点指点,这三者固定的原理及用途的区别?谢谢!
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ybs007

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

宏伟10(金币+1): 2011-07-31 12:15:49
甲醛(福尔马林)应用最广
原理:形成分子间的交联,影响蛋白构型而使之固定。
优点:形态结构保存好,且穿透性强,组织收缩少。
缺点:
1甲醛放置过久可氧化为甲酸,使溶液pH降低,影响染色;
2醛基与抗原蛋白的氨基交联形成羧甲基,使抗原决定簇的三维构象出现空间障碍;
3分子间交联形成的网格结构可能部分或完全掩盖某些抗原决定簇,使之不能充分暴露。可造成假阴性的染色结果。
-注意事项:
1缩短固定时间,降低固定温度(4C),为此组织块不宜过厚。
2改用中性缓冲福尔马林,以pH值7.2~7.4 0.01mol/L的磷酸盐缓冲液配制成10%甲醛固定液,减少固定液pH的变化。
3固定后充分水洗以减少分子间交联。
4切片在作免疫组化染色前,先经预处理使抗原再现(抗原修复)。
戊二醛:
穿透性强,微细结构保存好,但对抗原有一定影响,常与其他固定剂联合用作免疫电镜固定液。
多聚甲醛(常用4%):
可用于免疫电镜;也可用于免疫荧光染色。
主要检测组织内一些性能娇弱的抗原特别是细胞表面抗原,例如各类淋巴细胸分化决定簇(CD)、主要组织相容性抗原等。
平生我自知
2楼2011-07-27 10:48:02
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山风谷风

新虫 (初入文坛)

mark

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
山风谷风山谷风,海风陆风海陆风。
3楼2020-06-05 12:36:19
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