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laokuang1988

铜虫 (小有名气)

[求助] 真菌分子克隆

各位师兄师姐,我要开始做霉菌的未知序列目的片段克隆,不知道该怎么设计引物。是否有人可以帮我,谢谢!
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laokuang1988

铜虫 (小有名气)

求方法,谢谢
2楼2011-07-25 11:07:36
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love_st

金虫 (著名写手)


【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): 可以叙述的详细些? 2011-07-25 12:37:31
保守序列,简并 引物,pcr
3楼2011-07-25 11:31:09
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love_st

金虫 (著名写手)


【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-07-25 16:07:37
引用回帖:
Originally posted by love_st at 2011-07-25 11:31:09:
保守序列,简并 引物,pcr

http://wenku.baidu.com/view/7660e6bfc77da26925c5b0ad.html
4楼2011-07-25 12:50:12
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guozhibin

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-07-25 16:07:49
laokuang1988(金币+1): 2011-09-24 16:57:00
你可以找一些相近菌株 将目的基因或氨基酸序列进行比对,然后找出保守序列,设计简并引物,扩增出保守或是功能序列,然后使用RACE技术扩增出该片段的全长序列。
只是我自己的想法啊
5楼2011-07-25 13:20:20
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laokuang1988

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by guozhibin at 2011-07-25 13:20:20:
你可以找一些相近菌株 将目的基因或氨基酸序列进行比对,然后找出保守序列,设计简并引物,扩增出保守或是功能序列,然后使用RACE技术扩增出该片段的全长序列。
只是我自己的想法啊

谢谢,现在我也是这么做的,就是race要得到的模板是不是还要做文库啊?
6楼2011-09-24 16:59:53
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