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tcm2000

木虫 (著名写手)

[交流] 请教各位大侠：HPLC使用中的难题

本人在使用HPLC过程中碰到一个问题：相同浓度，相同进样量，流速越小，主成分峰面积越大？检测器系岛晶紫外，
  请教许多高人！！！！
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1楼 2006-11-01 17:28:44
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aux

铁杆木虫 (著名写手)
我帮你问问，原来的实验室老师不知道了解不
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2楼2006-11-01 18:55:25
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asymmetry

荣誉版主 (知名作家)

皇家神龍教-asymmetry

优秀版主
★ ★
tcm2000(金币+1):多谢，
yan4793(金币+1):谢谢参与应助，欢迎常来问题求助版！！: )
很奇怪！理论上分析，流速减小，会出现峰形变宽，变矮的现象，但总的峰面积是不会变的，因为流速减小，理论塔板数就会增加，应该各组峰分得更开，不会出现峰交盖的现象，也就不会出现峰面积变大的现象，峰面积的大小是和浓度成正比的，既然浓度不变，峰面积也不会变的。峰形变宽甚至会倾斜的现象是因为流动相流速过慢引起的。以上是我做HPLC的感触，个人愚见，仅供参考！！！
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3楼2006-11-01 19:20:23
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13073456851

金虫 (正式写手)
个人估计是因为有样品的异构体后者结构很相似的东西，在留苏比较大的时候两者可以被分开，而当流速较低时，两物质在固定相和流动相中分配趋于相等，这样两个东西就同时出峰了...
你可以看看较大流速是主峰附近的东西在低流速时有没有减少后缺失
祝你成功
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子非鱼，焉知鱼之乐？
4楼2006-12-06 12:44:04
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xx小小xx

木虫 (著名写手)
楼主说的峰面积是怎么积分的呀?如果是对时间积分的话,肯定是流速越小峰面积越大，就相当与横轴被放大了。如果是对保留体积积分，面积应该是不变的。
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5楼2006-12-06 22:23:36
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wenrong196

木虫 (正式写手)
个人经验,这应该是正常现象,因为液相软件的面积是拿积分算的,峰的形状发生了变化面积就应该不一样,做样品的时候要求流速相等有两个原因:一.使同一样品出峰时间相同.二.使相同量的成分峰面积相等.
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虫友的支持是本小虫继续前行的支撑！！！ 欢迎到我的博客跺跺脚 http://wenrong196.emuch.cn
6楼2007-02-05 10:08:49
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