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1楼 2011-07-24 16:56:11

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MaoNaiJi

金虫 (正式写手)

应助: 10 (幼儿园)
金币: 1662.3
散金: 120
红花: 1
帖子: 422
在线: 307.4小时
虫号: 874662
注册: 2009-10-16
性别: GG
专业: 生物化学

【答案】应助回帖

yupeibin(金币+2): 谢谢 2011-07-25 21:13:01

以前我做过，形态鉴定不是很可靠，最好做分子鉴定，方法如下：
提总RNA，然后逆转录cDNA,以其做模板，
做18S rRNA和ITS序列鉴定 1星期就有结果了然后去GenBank对比
对于18S rRNA:
TR1 5'-GTTTCTAGGACCGCCGTA-3'
(position 834) and
TR2 5'-CTCAAACTTCCATCGACTTG-
3' (position 1415).
对于ITS序列：
ITS1 5'-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3'
ITS4 5'-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3'
参考文献和网址：International Journal of Food Microbiology 69(2001).157–160,
Identification of fungi from dairy products by means of 18S
rRNA analysis; F. Cappa & P.S. Cocconcelli
http://www.biology.duke.edu/fungi/mycolab/primers.htm#Small subunit RNA (SR) primer sequences:

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4楼2011-07-25 13:07:05

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