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空蓝Y劫

新虫 (小有名气)

[求助] westen blot实验中一抗与二抗

westen blot实验中一抗与二抗怎么区分?

实验室中有两种,一种:
Anti-His Mab

另一种:

AP-goat  anti-Mouse lgG

请问哪一个是1抗,哪一个是2抗??
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busintramp

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
silicare(金币+8, EPI+1): 鼓励新虫应助 2011-07-23 17:09:59
Anti-His:指识别融合蛋白N末端、C末端的His-tag(六组氨酸)标签;
Mab:单克隆抗体(monoclonal Ab,mAb)
Anti-His Mab:指能与带六组氨酸末端的蛋白结合的抗体,即一抗。(六组氨酸通常用来做标记,从而目的蛋白可与Anti-His Mab结合)
AP:碱性磷酸酶(alkaline phosphatase)用于显色时与底物作用发生颜色反应,它只在二抗中有。
goat anti-Mouse:山羊抗鼠的抗体(因为一抗是在鼠中制得,二抗在山羊中制得)
lgG就不用说了~!
AP-goat  anti-Mouse lgG:带碱性磷酸酶的山羊抗鼠的抗体(二抗),能与一抗结合
其实,在我看来,一抗是起标记,二抗是起颜色反应检验的作用。
3楼2011-07-23 09:40:09
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子曰包子好吃

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

空蓝Y劫(金币+1): 本人专业不是这方面的,对这几个代号的意义能不能解释一下?比如anti IgG ,我想它们肯定有特定意义的吧? 2011-07-23 09:35:43
anti-his mab  是一抗; anti-mouse IgG 是抗鼠的二抗,也就是一抗是鼠来源的时候用的。
2楼2011-07-23 09:05:40
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busintramp

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

空蓝Y劫(金币+1): 哈哈,非常感谢,~~~ 2011-07-23 09:51:01
哦~你不是这专业的,lgG看来还是得说,lgG是抗体中的一种也是主要的抗体类型,平时说抗体一般就指lgG,其它还有IgA、IgM、IgD、IgE,共有五种类型抗体~!谢谢~!
4楼2011-07-23 09:47:38
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busintramp

银虫 (小有名气)

呵呵~有什么问题都可以拿出来讨论~讨论~!
5楼2011-07-23 10:06:31
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