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环保亮

银虫 (小有名气)

[求助] 求助

如何从培养液中把死亡的酿酒酵母细胞分离出来?
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环保亮
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1098585112

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
环保亮(金币+1): 还是多谢了! 2011-07-21 20:51:22
amisking(金币+4): 鼓励应助 2011-07-25 20:43:38
分离菌体一般采用离心的办法。不过一般很难保证无菌操作。先低速离心(小于5000转每分钟,一般为3000)3-5分钟,之后取上清液到一新的离心管中,20000R/min离心5分钟,下面的白色沉淀就应该是菌体了。
如果要确保不污染杂菌,就应该采用过滤的办法了。先用经过灭菌的纱布,过滤掉培养基以及其他比较大的物质,之后用过滤除菌的滤膜过滤(注射器法),过滤之后滤膜上就有菌体了,收集菌体一般把滤膜放到无菌水中清洗就可以了,之后该无菌水中就含有你要的菌体。
不过我还是喜欢离心的方法。
2楼2011-07-21 20:02:39
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶


amisking(金币+1): 鼓励发帖交流。 2011-07-25 20:43:44
楼主是想要去掉死的酵母保留活的,沙发楼的方法3000RPM我猜想无论死活都会被离心下去,起不到分离的作用的。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
3楼2011-07-21 20:28:54
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环保亮

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 1098585112 at 2011-07-21 20:02:39:
分离菌体一般采用离心的办法。不过一般很难保证无菌操作。先低速离心(小于5000转每分钟,一般为3000)3-5分钟,之后取上清液到一新的离心管中,20000R/min离心5分钟,下面的白色沉淀就应该是菌体了。
如果要确保 ...

仅分离菌体离心是可行的,问题是我要把死细胞分离出来,活细胞要留着。
环保亮
4楼2011-07-21 20:50:11
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iaminxanadu

木虫 (正式写手)

★ ★
amisking(金币+2): 鼓励新虫发帖交流。 2011-07-25 20:43:50
哈哈真的要分啊?
没做过这样的实验。

但应该可以分开吧。

首先可以试试配些溶液因为死细胞的生理特性,使得沉降系数的差异而分开。或者直接摸索一下低转数离心试试嘛~
还有,用流式细胞仪。
以上两个乱说的~
还有呢,用电泳,这个不是乱说的,以前学分析时有个老师讲过的。
5楼2011-07-21 20:58:43
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