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xibeijunzhu

新虫 (初入文坛)

[求助] EDC和NHS催化的蛋白酰化反应

丁二酸单胆固醇酯(CHS含有一个羧基)通过EDC和NHS催化作用将羧基活化,而后与白蛋白的氨基进行结合。反应条件为CHS、NHS溶于四氢呋喃,EDC-Hcl溶于水中,反应摩尔比为1:2:2, 室温反应过夜,产物有白色沉淀,本人是外行,还请各位虫友帮忙看一下,这个反应有何不妥之处。
还有考虑到活化反应可能不完全,将反应结束的活化酯溶液滴入白蛋白10mMPBS溶液(pH7.4)中,4度反应5小时,10mM(pH7.4)透析48h,离心去除沉淀。反应物产物应该如何表征呢?除了SDS-PAGE电泳。
谢谢各位
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