应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于cyt C问题
132/2返回列表上一页12
查看: 2994  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

xiaolangzzy

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

瘪(金币+5): 2011-07-27 08:26:10
根据我的经验，细胞色素c (cyt c)的分子量约为12kd，能够通过15%的SDS-PAGE较好地分离开，但是应注意染料条带不能跑过距离胶底1/3处，而且蛋白电转的时间不能太长（我用的是PVDF膜，方法为全湿法电转，条件为350mA，2h）。
santa的抗体虽然大部分不好用，但是cyt c的抗体还是比较好用的，稀释度记不清了，应该是1:1000吧。
我当时没有用预染的Marker，你若需要的话就买中分子量范围的就可以的。关键是在预实验的时候需要同时做一个阳性对照（购买的提纯的cyt c），不同物种的cyt c是非常保守相似的，所以不用担心抗体和购买的提出cyt c不合适的问题。
希望对你有帮助，祝好运！
赞一下 回复此楼
11楼2011-07-26 16:03:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

瘪

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by xiaolangzzy at 2011-07-26 16:03:04:
根据我的经验，细胞色素c (cyt c)的分子量约为12kd，能够通过15%的SDS-PAGE较好地分离开，但是应注意染料条带不能跑过距离胶底1/3处，而且蛋白电转的时间不能太长（我用的是PVDF膜，方法为全湿法电转，条件为350m ...

你好，我想请问下，那你买的是哪个公司的cyt C抗体呢？我就是在文献中查到这个抗体，我们实验室条件不大好，电泳仪和制胶装置都很老旧，所以我觉得要想出成果还是需要比较好的其他条件。
赞一下 回复此楼
12楼2011-07-27 08:25:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小损样儿

铁杆木虫 (职业作家)

爱可口不爱百事
引用回帖:
Originally posted by 瘪 at 2011-07-18 20:35:20:
我现在要做cyt C 的western ，买的抗体型号是SC-13156，请问有人用这个抗体么？怎么样？我要做这个，蛋白预染marker要买多大的？就是要根据cyt C的蛋白大小而定。还有就是做cyt C一抗的稀释度是多少？请有经验的前 ...

商品化抗体一般告知大约的稀释度，例如用PAP法可1：100～1：200稀释。但往往购买到一种新抗体后，需要利用组织切片进行最佳稀释度的测定。如果有做过相关的实验的话，可以参考别人抗体的稀释度。见附件
你买marker产品通常会包含5种以上预染的已知分子量标准蛋白质，只要分子量范围包含了cyt-c就行。Cyt C 是一种水溶性的小分子蛋白质，分子量约为12 kD，所以你如果买的marker分子量范围只要包含了12kd就行。这个咨询试剂公司就可以买得到。
赞一下 回复此楼
13楼2011-07-27 10:24:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 瘪 的主题更新
132/2返回列表上一页12
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[博后之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-29 19:27 by cqwQDCxMcL3I
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 4/200 2026-09-29 16:54 by yCO1Ll7aHtsw
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 4/200 2026-09-29 16:47 by yCO1Ll7aHtsw
[博后之家] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 16:30 by etmYJ6d2rquH
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 16:03 by etmYJ6d2rquH
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 15:46 by etmYJ6d2rquH
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 4/200 2026-09-29 15:15 by etmYJ6d2rquH
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 14:58 by etmYJ6d2rquH
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 6/300 2026-09-29 14:41 by etmYJ6d2rquH
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 3/150 2026-09-29 14:30 by etmYJ6d2rquH
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 6/300 2026-09-29 14:13 by etmYJ6d2rquH
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 3/150 2026-09-29 13:56 by etmYJ6d2rquH
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 5/250 2026-09-29 13:50 by etmYJ6d2rquH
[教师之家] 某top大学教授说“能够在市场中兑现的能力才是真能力”无比同意！ +8 zju2000 2026-09-26 9/450 2026-09-29 13:47 by ahsoarli
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 09:59 by JzYBbHIXWSrW
[教师之家] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 4/200 2026-09-29 09:49 by JzYBbHIXWSrW
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 06:28 by ZvyPK8n6Nfki
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-28 23:46 by b8fCuTHqckEt
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 3/150 2026-09-28 23:12 by b8fCuTHqckEt
[找工作] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 5/250 2026-09-28 22:32 by ez6fGg9abYaj
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭