24小时热门版块排行榜    

查看: 2560  |  回复: 12

xiaolangzzy

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

瘪(金币+5): 2011-07-27 08:26:10
根据我的经验,细胞色素c (cyt c)的分子量约为12kd,能够通过15%的SDS-PAGE较好地分离开,但是应注意染料条带不能跑过距离胶底1/3处,而且蛋白电转的时间不能太长(我用的是PVDF膜,方法为全湿法电转,条件为350mA,2h)。
santa的抗体虽然大部分不好用,但是cyt c的抗体还是比较好用的,稀释度记不清了,应该是1:1000吧。
我当时没有用预染的Marker,你若需要的话就买中分子量范围的就可以的。关键是在预实验的时候需要同时做一个阳性对照(购买的提纯的cyt c),不同物种的cyt c是非常保守相似的,所以不用担心抗体和购买的提出cyt c不合适的问题。
希望对你有帮助,祝好运!
11楼2011-07-26 16:03:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by xiaolangzzy at 2011-07-26 16:03:04:
根据我的经验,细胞色素c (cyt c)的分子量约为12kd,能够通过15%的SDS-PAGE较好地分离开,但是应注意染料条带不能跑过距离胶底1/3处,而且蛋白电转的时间不能太长(我用的是PVDF膜,方法为全湿法电转,条件为350m ...

你好,我想请问下,那你买的是哪个公司的cyt C抗体呢?我就是在文献中查到这个抗体,我们实验室条件不大好,电泳仪和制胶装置都很老旧,所以我觉得要想出成果还是需要比较好的其他条件。
12楼2011-07-27 08:25:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小损样儿

铁杆木虫 (职业作家)

爱可口不爱百事

引用回帖:
Originally posted by at 2011-07-18 20:35:20:
我现在要做cyt C 的western ,买的抗体型号是SC-13156,请问有人用这个抗体么?怎么样?我要做这个,蛋白预染marker要买多大的?就是要根据cyt C的蛋白大小而定。还有就是做cyt C一抗的稀释度是多少?请有经验的前 ...

商品化抗体一般告知大约的稀释度,例如用PAP法可1:100~1:200稀释。但往往购买到一种新抗体后,需要利用组织切片进行最佳稀释度的测定。如果有做过相关的实验的话,可以参考别人抗体的稀释度。见附件
你买marker产品通常会包含5种以上预染的已知分子量标准蛋白质,只要分子量范围包含了cyt-c就行。Cyt C 是一种水溶性的小分子蛋白质,分子量约为12 kD,所以你如果买的marker分子量范围只要包含了12kd就行。这个咨询试剂公司就可以买得到。
13楼2011-07-27 10:24:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 344求调剂 +5 knight344 2026-03-16 6/300 2026-03-18 15:17 by knight344
[考研] 314求调剂 +8 无懈可击的巨人 2026-03-12 8/400 2026-03-18 14:50 by haxia
[考研] 311求调剂 +6 26研0 2026-03-15 6/300 2026-03-18 14:43 by haxia
[考研] 收复试调剂生 +4 雨后秋荷 2026-03-18 4/200 2026-03-18 14:16 by elevennnne
[考研] 331求调剂(0703有机化学 +7 ZY-05 2026-03-13 8/400 2026-03-18 14:13 by 007_lilei
[考研] 一志愿天津大学化学工艺专业(081702)315分求调剂 +9 yangfz 2026-03-17 9/450 2026-03-18 12:38 by 尽舜尧1
[考研] 0854,计算机类招收调剂 +3 胡辣汤放糖 2026-03-15 6/300 2026-03-18 12:09 by 上岸上岸……..
[考博] 26博士申请 +3 1042136743 2026-03-17 3/150 2026-03-17 23:30 by 轻松不少随
[考研] 考研化学学硕调剂,一志愿985 +4 张vvvv 2026-03-15 6/300 2026-03-17 17:15 by ruiyingmiao
[考研] 308求调剂 +4 是Lupa啊 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:12 by ruiyingmiao
[考研] 085600材料与化工求调剂 +5 绪幸与子 2026-03-17 5/250 2026-03-17 16:40 by laoshidan
[考研] 梁成伟老师课题组欢迎你的加入 +8 一鸭鸭哟 2026-03-14 10/500 2026-03-17 15:07 by 一鸭鸭哟
[考研] 考研调剂 +3 淇ya_~ 2026-03-17 5/250 2026-03-17 09:25 by Winj1e
[考研] 267一志愿南京工业大学0817化工求调剂 +6 SUICHILD 2026-03-12 6/300 2026-03-17 09:24 by 雾散后相遇lc
[考研] 0854控制工程 359求调剂 可跨专业 +3 626776879 2026-03-14 9/450 2026-03-16 17:42 by 626776879
[考研] 085600调剂 +5 漾漾123sun 2026-03-12 6/300 2026-03-16 15:58 by 漾漾123sun
[考研] 材料与化工 323 英一+数二+物化,一志愿:哈工大 本人本科双一流 +4 自由的_飞翔 2026-03-13 5/250 2026-03-14 19:39 by hmn_wj
[考研] 255求调剂 +3 李嘉慧, 2026-03-12 4/200 2026-03-14 16:58 by 有只狸奴
[考研] 290求调剂 +7 ADT 2026-03-12 7/350 2026-03-13 15:17 by JourneyLucky
[考研] 270求调剂 085600材料与化工专硕 +3 YXCT 2026-03-11 3/150 2026-03-13 10:13 by houyaoxu
信息提示
请填处理意见