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liuyuncun

金虫 (小有名气)

[交流] 是不是蛋白质在pH为碱性时更容易结合在酶标板上 已有7人参与

一般的包被液都是pH9.6的碳酸缓冲液。求解
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学到老 活到老
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2楼2011-07-15 10:46:14
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labrat

木虫 (著名写手)


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一般都是.  意见 -: 算蛋白质 pI ?
3楼2011-07-15 11:32:45
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zsy1106

金虫 (小有名气)


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酶标板的材质多用聚苯乙烯(PS),PS与蛋白的结合是通过物理吸附结合的,靠的是蛋白质分子结构上的疏水基团与固相载体表面的疏水基团间的作用力。这种物理吸附是非特异性的,受蛋白质的分子量、等电点、浓度等的影响。所以楼上朋友的等电点计算是正解。
一般PS结合能力大概是300ng/cm2。
4楼2011-07-15 12:01:38
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hujinling0

金虫 (正式写手)


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路过。。。学习了
5楼2011-07-15 12:20:09
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liuyuncun

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by labrat at 2011-07-15 11:32:45:
一般都是.  意见 -: 算蛋白质 pI ?

我的蛋白是偏酸性的蛋白,在碱性溶液中包被应该会对其结构造成影响吧?
学到老 活到老
6楼2011-07-19 08:03:03
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trif

铜虫 (小有名气)


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有谁做过酸性以及中性的缓冲液的包被实验?效果如何?
大鬼
7楼2012-02-10 13:38:15
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morninghc

铜虫 (初入文坛)


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当然远离你的蛋白pI更好呀,你的酸性蛋白在酸性中靠近等电点时可能就沉淀了
8楼2012-02-10 16:57:47
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小周

铁杆木虫 (著名写手)


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不是,有的时候用中性包被液PBS效果会更好!
9楼2012-02-10 18:45:09
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