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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 关于液相的一个奇怪问题，请各位高手指教~~~~
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xiongba

铁虫 (小有名气)

[交流] 关于液相的一个奇怪问题，请各位高手指教~~~~ 已有18人参与

各位大神，小弟近期在做高效液相的时候碰到一个奇怪的问题：我在摸索流动相条件时，分别进100ng/ml、200ng/ml、500ng/ml的标准溶液各五针，可结果每针样品出峰的位置偏差都很大，有的17min就出来了，有的在22分钟才出！请问为什么同一个样品同一种物质出峰时间差异会这么打？！
     
       并且200ng/ml的第一针的峰面积和100ng/ml的最后一针的峰面积大致相等，500ng/ml的第一针的峰面积与200ng/ml的最后一针的峰面积大致相等。这又是怎么一个情况啊？！请各位大神们给小弟说说原因~……
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1楼 2011-07-14 11:07:52
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xiongba

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by leecius at 2011-07-14 15:40:51:
楼主请列出详细的色谱条件，并简单说一下你的样品的化学性质和所用的溶解样品的溶剂，这样我们才好帮你分析。

色谱柱是phenomenex 150×2mm，3um
柱温是30度
库伦阵列电化学检测器
待测样品是单胺类神经递质，流动相有缓冲盐，离子对试剂。溶解样品的溶剂是ringer溶液。
而且这个条件前几天还挺恒定的，后来换过几次流动相之后，相同条件就不稳定了，出峰时间一直在漂....
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14楼2011-07-14 16:14:00
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hch0608

金虫 (著名写手)
★
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样品在流动相里稳定不？
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2楼2011-07-14 11:33:09
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bjwangxun

金虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
novus(金币+1): 谢谢交流，欢迎常来药学版！ 2011-07-14 20:33:23
1、首先考虑设备问题。主要是流路是否通畅、色谱柱是否干净等。
2、所选择的流动相是否适宜？
3、如是单泵运行要考虑流动相的变化，如环境温度的影响等。
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xiongba
4楼2011-07-14 14:09:48
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xiongba

铁虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
Originally posted by bjwangxun at 2011-07-14 14:09:48:
1、首先考虑设备问题。主要是流路是否通畅、色谱柱是否干净等。
2、所选择的流动相是否适宜？
3、如是单泵运行要考虑流动相的变化，如环境温度的影响等。

以前我用这个条件没有这种情况啊~后来换了几种流动相，现在又换回来了，结果就不好了，我今天用流动相平衡了一上午，现在还是不行，第一针出峰时间是11分钟，第二针竟然是22分钟很无语啊……但是峰面积的平行性倒还不错……请大神再给我分析分析~~~~不胜感激啊~~~~
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5楼2011-07-14 14:35:42
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