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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 夹心免疫
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飞飞鱼yjf

新虫 (小有名气)

[求助] 夹心免疫

各位朋友：
    想请问下利用夹心免疫法测抗原时，怎么样选择抗体对？
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1楼 2011-07-12 20:51:03
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zsy1106

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
飞飞鱼yjf(金币+2): 很好 2011-07-13 09:38:28
lstt09nk(金币+3, EPI+1): good 2011-07-13 19:42:32
最简单的步骤是：
首先，包被抗体和标记抗体都要能和你的抗原结合，这一步的筛选通常用间接法。就是用抗原包被，待筛选抗体做为样品，相应标记有信号分子的二抗（如羊抗鼠HRP）再与待选抗体发生一次免疫反应的方式。
接下来，上一步筛选出的单抗分别做包被抗体和标记抗体，做交叉组合，选出灵敏度和特异性最好的一套。这里要注意的是，如果抗原是单体，包被抗体和标记抗体不能是针对抗原的同一个免疫表位的。
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2楼2011-07-12 21:54:11
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yaojc

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

飞飞鱼yjf(金币+1): 2011-07-17 11:31:55
要筛选不同的抗体配对，不一定是一对单抗，也有可能是单抗配多抗。一般包被单抗，标记可能是多抗
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专注、专心、专业
3楼2011-07-13 11:16:34
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juliana_zou11

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

双单抗配对筛选的话可以用竞争法检测是不是相同表位
也可以直接夹心配对摸索看
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4楼2011-07-13 12:56:56
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juliana_zou11

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

最好用相加ELISA，不过比较复杂，可能要得到想要的结果也要比较长的时间
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5楼2011-07-13 13:12:18
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