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减压柱层析 已有5人参与
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| 大家有没有用过减压柱层析的？对于柱子一般装多高？样品层又多高？二者有没有一定的比例？？如何根据薄层展开来选择过柱子的比例（或者说一般把Rf值控制在什么范围内，比较适合上住）？？谢谢了！！！ |
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xiaoxiao270
至尊木虫 (著名写手)
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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
qinhy(金币+1, EPI+1): 多谢回帖~ 2011-07-06 21:20:22
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
qinhy(金币+1, EPI+1): 多谢回帖~ 2011-07-06 21:20:22
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减压柱优点在于上样量大，缺点在于分离效果较差。我前段时间做工艺跑了一年的减压柱，给你总结下吧。 1：上样，我们做植化采用的是直径30cm的布氏漏斗，上样量最多150g，拌样硅胶200g，柱硅胶400g左右，这时候柱硅胶基本上比拌好的样品就高一点。做工艺的时候，只要其中的一个单体，上下距离比较远的情况，采用直径80CM的布氏漏斗，样品一公斤，拌样硅胶1.5kg，柱硅胶1kg，这时候柱硅胶远低于拌好的样品。 2：洗脱，一搬3个柱体积一个梯度，植化粗分时候基本7到8个梯度，100-200g样品2天内完成。 最大的特点是上样量大，以前大柱子上样最多也就几百克，要跑一个月，现在可以上1kg 的样品，最快两天就能跑完，粗分的话效果和普通大柱子差不多，而且可以减少大极性样品的死吸附。 缺点：几十克到十几克的样品就不推荐了，普通的加压柱就可以搞定，效果一般都比较好 |
3楼2011-07-06 11:16:28
2楼2011-07-06 09:58:46
4楼2011-07-06 20:32:36
xiaoxiao270
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5楼2011-07-06 22:17:01