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zzgbest007

银虫 (小有名气)

[交流] 减压柱层析 已有5人参与

大家有没有用过减压柱层析的?对于柱子一般装多高?样品层又多高?二者有没有一定的比例??如何根据薄层展开来选择过柱子的比例(或者说一般把Rf值控制在什么范围内,比较适合上住)??谢谢了!!!
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xiaoxiao270

至尊木虫 (著名写手)

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qinhy(金币+1, EPI+1): 多谢回帖~ 2011-07-06 21:20:22
减压柱优点在于上样量大,缺点在于分离效果较差。我前段时间做工艺跑了一年的减压柱,给你总结下吧。
1:上样,我们做植化采用的是直径30cm的布氏漏斗,上样量最多150g,拌样硅胶200g,柱硅胶400g左右,这时候柱硅胶基本上比拌好的样品就高一点。做工艺的时候,只要其中的一个单体,上下距离比较远的情况,采用直径80CM的布氏漏斗,样品一公斤,拌样硅胶1.5kg,柱硅胶1kg,这时候柱硅胶远低于拌好的样品。
2:洗脱,一搬3个柱体积一个梯度,植化粗分时候基本7到8个梯度,100-200g样品2天内完成。
最大的特点是上样量大,以前大柱子上样最多也就几百克,要跑一个月,现在可以上1kg 的样品,最快两天就能跑完,粗分的话效果和普通大柱子差不多,而且可以减少大极性样品的死吸附。
缺点:几十克到十几克的样品就不推荐了,普通的加压柱就可以搞定,效果一般都比较好
分离、分离
3楼2011-07-06 11:16:28
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太白药谷

铜虫 (著名写手)

同问,学习ing~
2楼2011-07-06 09:58:46
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zzgbest007

银虫 (小有名气)

现在我还有个问题 就是  咱们装的常压柱  在下边接一个真空泵进行减压,  这种能不能算减压柱色谱啊 ???这种效果怎么样啊???
4楼2011-07-06 20:32:36
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xiaoxiao270

至尊木虫 (著名写手)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
Originally posted by zzgbest007 at 2011-07-06 20:32:36:
现在我还有个问题 就是  咱们装的常压柱  在下边接一个真空泵进行减压,  这种能不能算减压柱色谱啊 ???这种效果怎么样啊???

一样一样,只要抽干就是减压柱
分离、分离
5楼2011-07-06 22:17:01
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