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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
西瓜(金币+5, EPI+1): 经验啊! 2011-07-01 18:04:52
我们用TAKARA的T4 DNA ligase,连接没有什么问题呀。。。

其实楼主,我想说的是你用了好几种连接酶都没有连接上,那大部分可能性应该就是你载体和基因的问题了,跟酶的关系应该不大。
首先:
1:你的载体酶切的是否干净?如果酶切不完全,那么很影响连接的;
2:还有你的基因酶切的情况呢?
3:连接体系以及感受态细胞效率如何?
4:筛选标记等等。。。。
虽然做一个连接看似简单,实则并不是那么回事的。。。
所以每一步都找找问题,相信最终问题总会解决的。。。
祝好运!

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Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
5楼2011-07-01 17:13:53
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智能机器人

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我们都爱小木虫

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