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p120933799

金虫 (小有名气)

[求助] 连接转换

用PCR回收产物做连接转化,用的是pMD18-T载体连接,连接后进行红白板筛选,之后进行菌落pcr,发现菌落PCR条带比PCR回收时候条带小了!为何?
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青菜小虫

银虫 (著名写手)

风居住的街道

【答案】应助回帖

p120933799(金币+2): 谢谢指点,我也有这方面的怀疑 2011-07-01 21:42:06
p120933799(金币+3): 2011-07-02 08:54:31
我没有做过红白斑和蓝白斑筛选,我把目的片段和pMD18-T连接转化后,直接对挑取菌落的一般做PCR,之后平板继续培养。有目的条带的就是所选的菌落,然后你再挑取此菌落摇菌就可以。我估计你的情况是连接了PCR的杂带
生命即这般无尽变数,辗转来去皆苛求不得
2楼2011-07-01 14:43:47
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