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kingtsar

禁虫 (小有名气)

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11楼2014-10-15 11:04:47

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mini兔FF

新虫 (初入文坛)

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2楼: Originally posted by zsy1106 at 2011-06-30 19:10:23
1、根据你的蛋白的性质，选择合适的介质和条件，想办法把蛋白结合在柱子上，（有tag的话用这个方法最好了），然后用高盐（0.5-3M NaCl）洗，一般会洗下来一个峰，就是被洗下来的核酸了。
2、试试在高盐条件下加Mn2 ...

你好，看了你的回答，想请教几个问题。我的是大肠表达的，由于有核酸结合区，目的蛋白中核酸含量很高，经过离子柱纯化后，260还是远高于280。想请教下，如果我用Mn2+来除核酸的话，一般用多高的浓度，会不会影响到离子柱的纯化效果？还有其他的方法把蛋白和核酸分开，不影响到蛋白的活性吗？谢谢

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12楼2014-12-01 16:01:27

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whb21

木虫 (著名写手)

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引用回帖:

12楼: Originally posted by mini兔FF at 2014-12-01 16:01:27
你好，看了你的回答，想请教几个问题。我的是大肠表达的，由于有核酸结合区，目的蛋白中核酸含量很高，经过离子柱纯化后，260还是远高于280。想请教下，如果我用Mn2+来除核酸的话，一般用多高的浓度，会不会影响到 ...

楼主好，我也在做蛋白纯化，想请教如何判定纯化出的蛋白样品中是否混有核酸，通过比较A260和A280是否可以？

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13楼2015-04-16 20:49:21

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