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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 蛋白纯化怎么去除核酸
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kingtsar

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
11楼2014-10-15 11:04:47
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mini兔FF

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zsy1106 at 2011-06-30 19:10:23
1、根据你的蛋白的性质，选择合适的介质和条件，想办法把蛋白结合在柱子上，（有tag的话用这个方法最好了），然后用高盐（0.5-3M NaCl）洗，一般会洗下来一个峰，就是被洗下来的核酸了。
2、试试在高盐条件下加Mn2 ...

你好，看了你的回答，想请教几个问题。我的是大肠表达的，由于有核酸结合区，目的蛋白中核酸含量很高，经过离子柱纯化后，260还是远高于280。想请教下，如果我用Mn2+来除核酸的话，一般用多高的浓度，会不会影响到离子柱的纯化效果？还有其他的方法把蛋白和核酸分开，不影响到蛋白的活性吗？谢谢
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12楼2014-12-01 16:01:27
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whb21

木虫 (著名写手)
引用回帖:
12楼: Originally posted by mini兔FF at 2014-12-01 16:01:27
你好，看了你的回答，想请教几个问题。我的是大肠表达的，由于有核酸结合区，目的蛋白中核酸含量很高，经过离子柱纯化后，260还是远高于280。想请教下，如果我用Mn2+来除核酸的话，一般用多高的浓度，会不会影响到 ...

楼主好，我也在做蛋白纯化，想请教如何判定纯化出的蛋白样品中是否混有核酸，通过比较A260和A280是否可以？
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13楼2015-04-16 20:49:21
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goodluckhc

新虫 (初入文坛)
楼主您好，我现在也是在做一个转录因子的纯化，蛋白中残留有大量的核酸，无意间看到你发的帖子，想知道后来是如何解决问题的，请您分享。多谢！
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14楼2016-02-18 18:32:51
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佩琪

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by sxxuan at 2013-06-03 15:03:33
请问这篇专利在哪里？好想看！...

您好！您找到这篇专利吗？如果有的话，可以发我一份吗？谢谢~
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15楼2021-08-09 18:01:19
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