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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 关于透析
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amon7788

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于透析

我们是分子的实验室   透析做的少   这方面真的很不了解
从诱导表达的菌体中要得到130kDa的表达蛋白（量较少）应该用什么规格的透析袋呢，什么材质比较好？
如果可以用透析来浓缩的话要怎么操作？
武汉这边哪个公司有呢？
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花枝春满，天心月圆
1楼 2011-06-27 15:50:18
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amon7788

新虫 (初入文坛)
自己顶
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花枝春满，天心月圆
2楼2011-06-27 20:52:16
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小新a

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

拿本生物学方面的书看看吧
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3楼2011-06-27 22:48:25
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

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【答案】应助回帖

amon7788(金币+10): 谢谢 2011-06-30 11:57:51
130kDa的蛋白用40-50kDa 截留量的透析袋都行。透析袋的材质一般都是纤维素类的，只要不是纤维素酶，没有必要特别选择。

透析袋主要是用来透析酶切或者换buffer的。

如果非要透析浓缩的话，可以在透析袋外面加PEG，从而达到浓缩的效果。
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The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
4楼2011-06-28 01:38:58
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amon7788

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2011-06-28 01:38:58:
130kDa的蛋白用40-50kDa 截留量的透析袋都行。透析袋的材质一般都是纤维素类的，只要不是纤维素酶，没有必要特别选择。

透析袋主要是用来透析酶切或者换buffer的。

如果非要透析浓缩的话，可以在透析袋外面 ...

那可不可以用100kDa的呢？想把杂蛋白去得彻底一点
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花枝春满，天心月圆
5楼2011-06-28 13:25:52
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brightfuture01

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【答案】应助回帖

引用回帖:
Originally posted by amon7788 at 2011-06-28 13:25:52:
那可不可以用100kDa的呢？想把杂蛋白去得彻底一点

我一般选择透析袋的时候，截留量不超过目的蛋白大小的1/2。你用100kDa的透析袋的话，可能会有点损失。你可以试试看，也说不准的。

另外需要补充的一点是，透析袋的主要作用并不是去除杂蛋白。
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6楼2011-06-28 13:33:22
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amon7788

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2011-06-28 13:33:22:
我一般选择透析袋的时候，截留量不超过目的蛋白大小的1/2。你用100kDa的透析袋的话，可能会有点损失。你可以试试看，也说不准的。

另外需要补充的一点是，透析袋的主要作用并不是去除杂蛋白。

学到不少    非常感谢

我用透析袋主要是想浓缩样品    另外就是尽量把对纯化有影响的杂蛋白去掉

看来不能一劳永逸啊     呵呵
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花枝春满，天心月圆
7楼2011-06-28 16:23:17
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