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wb529656446

铁虫 (小有名气)

[求助] 测细胞NO用什么试剂啊

测细胞NO,不用试剂盒,能用什么试剂啊?
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破土草儿

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
karl2100(金币+1): 谢谢! 2011-06-15 18:57:34
wb529656446(金币+1): 2011-07-01 14:25:44
引用回帖:
Originally posted by wb529656446 at 2011-06-15 10:42:26:
测细胞NO,不用试剂盒,能用什么试剂啊?

由于NO不稳定,在体内会形成NO2-,NO3-,和超氧硝基离子等,检测的方法也具有很多种,比较粗糙的方法就是用一些试剂捕获,或者检测一些与NO相关的指标成分的方法,如LZ所说,常用的检测NO试剂有:
1、Griess试剂,由1%对氨基苯磺酰胺,0.1%N-(1-奈基)-乙二胺,5%H3PO4组成,通过还原NO3-为NO2-,然后NO2-与Griess试剂反应测得NO3-/NO2-,间接检测NO含量,所以此种方法专属性不强;
2、硝酸i还原酶,由此酶特异性还原NO3-为NO2-,然后如1方法,测得的还是间接的NO含量;
3、间接测量NO的含量,可以检测瓜氨酸、NOS、CGMP的含量,试剂自己查找。
想要直接测得NO的含量,通用的有1、电化学还原的方法,将一系列含有N、O的基团还原为NO,然后根据电极膜电位的不同定量;2、利用捕获试剂N-甲基-D-葡糖胺二硫代甲酸铁[(MGD)2-Fe2+]等特异性捕获NO,用ESR方法检测NO。
LZ,如果单纯用一些试剂检测NO,很多情况会出现假阳性结果!如果有条件,建议用ESR和测量NOS的方法检测NO。
2楼2011-06-15 12:55:12
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