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yangxiaotian

金虫 (正式写手)

[交流] 求助, HPLC峰图拖尾

我正在用HPLC,测量香附药材中α-香附酮的含量。用水蒸气蒸馏法提取药材中的挥发油,然后用适量甲醇定容挥发油。以挥发油为供试品,进样测量α-香附酮含量。
我遇到的问题是,α-香附酮的峰总是拖尾,并且峰尾没有回到坐标0位置,距离0位置还差一些,就开始出现平行的基线,但整个峰形基本完整。
液相机器是岛津的LC-10A ,检测波长241nm,柱温30℃,流速1.0ml/min,进样量10μl,流动相:甲醇-水:74-26。
我想把HPLC图贴上,但不知道怎么贴?
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我为人人,人人为我。
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月亮弯弯

金虫 (著名写手)

0.25

你可以改变一下流动相的比例,如果你是反相色谱,而且色谱柱是好的话,你可以适当增加甲醇的比例,让样品早出峰,看看样品峰是否还拖尾?.
2楼2006-10-12 18:35:48
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无双国士

至尊木虫 (著名写手)

0.5

★ ★
cpucf(金币+2):3Q
1、流动相的极性有问题。
2、柱温箱的温度是否稳定。
3、色谱柱“老化”。


建议:
1、调节柱温箱温度。
2、调节流动相的有机相比例。
3、换根新的色谱柱试试看。
拔毛的凤凰真的不如个鸡吧?
3楼2006-10-12 19:37:03
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qian_hecm

铁虫 (初入文坛)

0.25

调整流动相比例,在点三乙胺。
http://www.ada.cn/?u=485
4楼2006-10-13 10:50:36
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yanhai2006

银虫 (小有名气)

我认为可能有两方面的原因
1 色谱柱使用时间过长,导致表面的键合的基团流失,硅羟基增多,造成脱尾。
2 流动相可以试试 加点三乙胺,调一下Ph值。
5楼2006-10-13 11:39:50
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yangxiaotian

金虫 (正式写手)

感谢大家。
请问,3楼和4楼的,为什么,加三乙胺?有人,告诉我,加醋酸,调节Ph值。据我所知,如对照品是偏酸性的,流动相应加少量酸,如醋酸,磷酸;对照品是偏碱性的,流动相应加少量碱,如三乙胺。可我用的对照品是,酮类,中性。
柱温30℃,用柱温箱保温。柱子是比较新的,用了一个月,应该没有问题,是碳18反相柱。
我正在调节流动相中,有机溶剂比例。
我为人人,人人为我。
6楼2006-10-13 19:03:34
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Terson

金虫 (著名写手)

1) 先测流动相之pH 然后加约10ml之三乙胺再以磷酸调回原来之pH值则拖尾现象会有所改善
2) 如拖尾不严重可用Acetonitrile 代替Methanol 再调整水相和有机相之比例 try 看看
7楼2006-10-13 22:32:57
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xgkzb

金虫 (正式写手)

0.5

香附酮受热分解吧???
8楼2006-10-14 01:01:13
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taojunyan_2001

银虫 (小有名气)

个人建议:
1、更换流动相,加入一定的酸,使偏酸性,一般对酸性或者中性物质都有改善,
2、注意样品浓度,不能太大,否则也可能拖尾。
9楼2006-10-14 07:36:17
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jzx_001

银虫 (小有名气)

0.25

保留时间是多少?  从"流动相:甲醇-水:74-26"来看完全可以把甲醇换乙腈试试,调节比例和pH看看,查一下文献.看看这个物质的的结构和性质(如稳定性和pKa等等).
10楼2006-10-14 14:32:55
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