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各位大虾,急救啊~~~我在做微生物诱变,一直是没有诱变出来,现在从头一步一步分析原因。 首先发现我的测定生物量的方法与文献不同,文献资料测丙酸杆菌的生物量方法是取1ml经培养的发酵液,用9ml的0.1mol/L的HCl稀释10倍,用722型分光光度计在波长为600nm处测定吸光度;我自己测生物量是直接从平板中挑取一环到无菌生理盐水中,制备成原液,然后再依次稀释不同的倍数来测定,空白为无菌生理盐水。这两者有何区别? 其次,在制备诱变用的菌悬液时,我采用的是无菌生理盐水,而很多文献资料上是使用tris-HCl缓冲液,这样子会不会影响诱变效果? 最后,我使用的是2次紫外诱变,2次诱变之间的间隔是光修复,是不是说只要光修复时间大于第一次诱变的时间就可以了????还是说要大于一个具体的时间??? 谢谢各位大虾的指教~~~ |
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