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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » WB显影用手动曝光，加入ECL底物，为什么在吸走底物后，就没有亮光了？
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chunmeiyang

银虫 (正式写手)

[求助] WB显影用手动曝光，加入ECL底物，为什么在吸走底物后，就没有亮光了？

我在做WB显影时，加入ECL底物后，有很亮很明显的亮带，但是一旦把底物的溶液吸走  亮光立马消失~加入底片 再显影就没有条带  这是为什么啊  大家有没有遇到过这种问题啊
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1楼 2011-06-02 09:00:01
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linyingjia

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

chunmeiyang(金币+1): 2011-09-28 08:39:39
为什么把底物吸走呢   放在一个塑料袋里夹着    直接曝光
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4楼2011-09-27 09:48:54
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晴天1882

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
lstt09nk(金币+2): 鼓励交流 2011-09-27 16:35:49
chunmeiyang(金币+1): 2011-09-28 08:39:54
可能还没结合好，那你就不把ECL吸走，包个保鲜膜在膜上，再用胶片显影看看。我之前是这样做的还不错。
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人有绝交，才有至交！
2楼2011-09-26 21:49:01
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yang0071

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
silicare(金币+3): 这个可能性最大 2011-09-27 16:38:44
chunmeiyang(金币+1): 2011-09-28 08:39:47
荧光淬灭比较快也有可能
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3楼2011-09-26 21:59:32
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shaman2

捐助贵宾 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
lstt09nk(金币+6): 感谢参与，欢迎常来 2011-09-27 16:36:10
chunmeiyang(金币+1): 2011-09-28 08:40:03
原因可如下
1。 你的显色液要过期或者有其他问题，导致结合不能，如果有同组人员也在应用，而且效果很好，便可排除。
2。之后，就是你膜的问题了，可能没洗干净或者残留其他物质阻碍结合。
3。反应过于迅速，不是说你把液体吸走了，他就不亮了。而是已经发光完毕，说明发光液有问题。
4。处理办法：换发光液，把膜褪掉重杂，或者重新在跑。
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5楼2011-09-27 15:42:09
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