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hwj110

新虫 (正式写手)

[求助] 色谱分析

请教各位虫友,在做液相色谱时,如果用梯度洗脱时是不是基线会上升,感觉整个图是斜的?
我如果不用梯度的话,后面会有一点拖尾,怎么处理啊?
新手求助!
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液晶化学

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

hwj110(金币+2): 那一般应该加什么盐啊 2011-06-01 11:53:52
梯度不是为了抑制拖尾的,梯度是为了提高分离度,抑制拖尾的方法是加算活着缓冲盐。
得之我幸,失之我命。
2楼2011-06-01 09:25:08
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guoyayun40

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

hwj110(金币+2): 谢谢了 2011-06-01 11:55:56
走梯度时,基线是不怎么平,只是不是太斜就行,除了这个问题,走梯度还容易出现鬼峰
3楼2011-06-01 11:04:18
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fengxiaojiao

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

如果分离多个组分可以选择梯度洗脱,基线斜是因为流动相B比A的吸收大,这时候可以在A中添加少量的B。
4楼2011-06-01 11:31:16
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hwj110

新虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 液晶化学 at 2011-06-01 09:25:08:
梯度不是为了抑制拖尾的,梯度是为了提高分离度,抑制拖尾的方法是加算活着缓冲盐。

那一般应该加什么盐啊?
5楼2011-06-01 11:55:05
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zgf340631735

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

引用回帖:
Originally posted by hwj110 at 2011-06-01 11:55:05:
那一般应该加什么盐啊?

三乙胺
看你具体的情况,梯度基线是会波动。调节你下比例变化的时间。只是有点斜的话好解决。
学无止境
6楼2011-06-01 12:52:13
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hwj110

新虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by zgf340631735 at 2011-06-01 12:52:13:
三乙胺
看你具体的情况,梯度基线是会波动。调节你下比例变化的时间。只是有点斜的话好解决。

我发现我的峰有点胖,15.2的峰高,0.26的峰宽,这正常吗?
还有就是想请教下,我用外标法做标准曲线,峰面积最好用手动积分还是自动积分啊?
如果自动的话好像把拖尾的那部分也会算在内!
7楼2011-06-01 15:25:19
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zgf340631735

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

引用回帖:
Originally posted by hwj110 at 2011-06-01 15:25:19:
我发现我的峰有点胖,15.2的峰高,0.26的峰宽,这正常吗?
还有就是想请教下,我用外标法做标准曲线,峰面积最好用手动积分还是自动积分啊?
如果自动的话好像把拖尾的那部分也会算在内!

柱压、出峰时间是多少?可以再提高流速,提高一点柱温试试(一定要在柱子的耐受范围内)。看看峰形有没有改善。样品对pH敏感吗?也可以调节pH试试。
外标做曲线最好还是自动积分。手动积分的话人为变动误差太大。
学无止境
8楼2011-06-01 15:59:06
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液晶化学

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我们加的是磷酸二氢钾和磷酸氢二钾,主要调节PH.
得之我幸,失之我命。
9楼2011-06-01 16:49:24
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hwj110

新虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by zgf340631735 at 2011-06-01 15:59:06:
柱压、出峰时间是多少?可以再提高流速,提高一点柱温试试(一定要在柱子的耐受范围内)。看看峰形有没有改善。样品对pH敏感吗?也可以调节pH试试。
外标做曲线最好还是自动积分。手动积分的话人为变动误差太 ...

柱压70左右吧!5.8min出峰。1ml/min的流速,柱温30!
如果调节PH的话,是加在水里还是加到甲醇中!如果是我这种情况,该加碱还是加酸啊!
请你帮我看看我这两张图,

在四分钟左右的时候基线就会变化,仪器就会认为是峰,其实这在纯甲醇中也存在,应该是溶剂的峰吧?峰后面的那算是拖尾吗?
我刚开始做,实验室也没有人做过,所以麻烦您帮我解答一下!
10楼2011-06-01 19:33:08
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