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hwj110

新虫 (正式写手)

[求助] 色谱分析

请教各位虫友，在做液相色谱时，如果用梯度洗脱时是不是基线会上升，感觉整个图是斜的？
我如果不用梯度的话，后面会有一点拖尾，怎么处理啊？
新手求助！
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1楼 2011-06-01 09:21:34
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液晶化学

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

hwj110(金币+2): 那一般应该加什么盐啊 2011-06-01 11:53:52
梯度不是为了抑制拖尾的，梯度是为了提高分离度，抑制拖尾的方法是加算活着缓冲盐。
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得之我幸，失之我命。
2楼2011-06-01 09:25:08
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guoyayun40

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

hwj110(金币+2): 谢谢了 2011-06-01 11:55:56
走梯度时，基线是不怎么平，只是不是太斜就行，除了这个问题，走梯度还容易出现鬼峰
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3楼2011-06-01 11:04:18
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fengxiaojiao

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

如果分离多个组分可以选择梯度洗脱，基线斜是因为流动相B比A的吸收大，这时候可以在A中添加少量的B。
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4楼2011-06-01 11:31:16
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hwj110

新虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 液晶化学 at 2011-06-01 09:25:08:
梯度不是为了抑制拖尾的，梯度是为了提高分离度，抑制拖尾的方法是加算活着缓冲盐。

那一般应该加什么盐啊？
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5楼2011-06-01 11:55:05
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zgf340631735

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

引用回帖:
Originally posted by hwj110 at 2011-06-01 11:55:05:
那一般应该加什么盐啊？

三乙胺
看你具体的情况，梯度基线是会波动。调节你下比例变化的时间。只是有点斜的话好解决。
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学无止境
6楼2011-06-01 12:52:13
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hwj110

新虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by zgf340631735 at 2011-06-01 12:52:13:
三乙胺
看你具体的情况，梯度基线是会波动。调节你下比例变化的时间。只是有点斜的话好解决。

我发现我的峰有点胖，15.2的峰高，0.26的峰宽，这正常吗？
还有就是想请教下，我用外标法做标准曲线，峰面积最好用手动积分还是自动积分啊？
如果自动的话好像把拖尾的那部分也会算在内！
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7楼2011-06-01 15:25:19
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zgf340631735

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

引用回帖:
Originally posted by hwj110 at 2011-06-01 15:25:19:
我发现我的峰有点胖，15.2的峰高，0.26的峰宽，这正常吗？
还有就是想请教下，我用外标法做标准曲线，峰面积最好用手动积分还是自动积分啊？
如果自动的话好像把拖尾的那部分也会算在内！

柱压、出峰时间是多少？可以再提高流速，提高一点柱温试试（一定要在柱子的耐受范围内）。看看峰形有没有改善。样品对pH敏感吗？也可以调节pH试试。
外标做曲线最好还是自动积分。手动积分的话人为变动误差太大。
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学无止境
8楼2011-06-01 15:59:06
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液晶化学

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我们加的是磷酸二氢钾和磷酸氢二钾，主要调节PH.
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得之我幸，失之我命。
9楼2011-06-01 16:49:24
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hwj110

新虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by zgf340631735 at 2011-06-01 15:59:06:
柱压、出峰时间是多少？可以再提高流速，提高一点柱温试试（一定要在柱子的耐受范围内）。看看峰形有没有改善。样品对pH敏感吗？也可以调节pH试试。
外标做曲线最好还是自动积分。手动积分的话人为变动误差太 ...

柱压70左右吧！5.8min出峰。1ml/min的流速，柱温30！
如果调节PH的话，是加在水里还是加到甲醇中！如果是我这种情况，该加碱还是加酸啊！
请你帮我看看我这两张图，

在四分钟左右的时候基线就会变化，仪器就会认为是峰，其实这在纯甲醇中也存在，应该是溶剂的峰吧？峰后面的那算是拖尾吗？
我刚开始做，实验室也没有人做过，所以麻烦您帮我解答一下!
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10楼2011-06-01 19:33:08
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