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小木虫论坛-学术科研互动平台» 网络生活区» 有奖问答 » 有奖问答完结子版 » 用pMD-18T simple 双向测序，PCR验证有条带，结果却是空质粒
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treeseed

禁虫 (初入文坛)
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1楼 2011-05-30 17:13:05
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donnie2226

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

treeseed(金币+20, 博学EPI+1): 谢谢 2011-06-04 13:45:37
可能原因：模板污染了（引物/PCR缓冲液等被模板污染了），建议做阴性对照（用水或缓冲液做模板，如果也能P出，说明污染了模板）。
同时建议做双酶切鉴定，双酶切加PCR鉴定都没问题的话，一般就表明连上了。
祝：实验顺利
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2楼2011-05-30 17:28:45
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donnie2226

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我没用过你说的pMD-18T simple 载体
如果上面有通用引物，也可以用通用引物PCR鉴定下，这样可以排除污染。
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3楼2011-05-30 17:32:06
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