| 查看: 519 | 回复: 1 | ||
[求助]
HPLC 检测样品出峰问题，怎么解决才好？？
|
|
分不开的峰！ 本人现在在用HPLC-ECD检测6-OHDA。 文献流动相是：25mM柠檬酸，125mM磷酸钠（文献中写的是sodium phosphate），100mg/lEDTA，30mg/lSOS，配置好后用磷酸调节pH至2.5。 在我的实际操作中，先后试过pH=3.0, 3.5, 3.8, 4.1。出峰时间基本在4-6分之间（其中pH3.8出峰时间相对最好，在5-6分之间，而且出峰时间随着时间的进行一点一点往后移，这也是我很纠结的地方，怀疑是我操作问题，但找不到原因），但是我们测实际脑样品时，出现了一个大峰，时间从2分持续到5分（有拖尾现象），这样就影响到了6-OHDA，我们无法判断到底是不是6-OHDA。 后来我改了流动相：125mM柠檬酸（原来是25mM），125mM磷酸钠（文献中写的是sodium phosphate），100mg/lEDTA，30mg/lSOS，配置好后用磷酸调节pH至3.5。我检测了只有6-OHDA的样品，很奇怪，在 4-5分出了一个峰，11-12分出了一个峰，4针都是这样。然后我进了添加了6-ohda的脑样本，之前说的大峰倒是没有了，但是变成一个一个小峰（2-6分之间），而且11-12分的6-OHDA也没有出现，还是无法判断6-OHDA. 我很迷茫现在，我不知道我应该如何改进方法。 请各位大侠帮忙 |
回复此楼» 猜你喜欢
自荐读博
已经有9人回复
-
投稿Elsevier的杂志（返修），总是在选择OA和subscription界面被踢皮球
已经有8人回复
-
自然科学基金委宣布启动申请书“瘦身提质”行动
已经有4人回复
-
求个博导看看
已经有18人回复
2楼2011-05-31 09:27:54