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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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雨林碟影

铜虫 (初入文坛)

[交流] PCR阴性老出 已有2人参与

我做的PCR亚克隆
基因:2ul
上下游引物:0.5 ul
qd plous :10ul
h2o 阳性：7ul  阴性:9ul
分别做了5支，加一支阴性管
电泳结果是阴性和阳性条带长短，亮度都差不多，是什么原因啊
引物和水应该不会污染，还有加样很小心
怎么阴性还是出了
还要继续胶回收吗？
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1楼 2011-05-20 17:38:33
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雨林碟影

铜虫 (初入文坛)
★
amisking(金币+1): 鼓励应助 2011-05-20 22:01:28
每个样都换枪头
电泳还是先加的阴性
电泳液也换新的了
怎么阴性的就和阳性的一个样子
不知道出现这种现象最大的原因是什么
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3楼2011-05-20 19:24:47
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seamuse

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
我最近做转基因植株检测，水老出带，水，引物等都换过一遍了，加样也很小心，但还是继续有污染的，我觉得你可以去别人实验室做一下！或许有不一样的结果
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When you want success as badly as you wanted air, you will get it.----------------------一个人只有当他把追求真理当作一种内在的需要时，才算是真正的...
2楼2011-05-20 18:09:11
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zemin_fang

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
amisking(金币+2, EPI+1): 鼓励应助 2011-05-20 22:01:35
在回答楼主的问题之前，我需要指出1个问题：
分子生物学中，在体系中添加组分的时候，请不要用ul来衡量，需要转换成摩尔数，这样才能真正的反映体系中的物质的量。

你PCR获得的片段，跟你预期获得的片段大小一致吗？
不要认为水不会出问题，需要设计实验对照来证明其没有问题。
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2011-05-20 20:10:19
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