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小木虫论坛-学术科研互动平台» 网络生活区» 有奖问答 » 有奖问答完结子版 » 十万火急，高金币~~对于一个未知生物大分子分离纯时，应如何设计实验程序？？
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a240188

银虫 (小有名气)

[求助] 十万火急，高金币~~对于一个未知生物大分子分离纯时，应如何设计实验程序？？

如题~急用，请各位万能的虫友解决我的燃眉之急，谢谢~
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1楼 2011-05-16 15:44:50
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newtime007

木虫 (正式写手)

成长的微生物

【答案】应助回帖

a240188(金币+20, 博学EPI+1): 2011-05-16 23:03:45
你是蛋白还是大分子化合物
蛋白的话先跑凝胶，判断出分子量的大小，在进一步选凝胶柱分离。
大分子化合物的话，因该知道分子大小和极性吧，分离用树脂柱和硅胶柱，最后用色谱吧。
由于你没说清楚问题，不能给与更多的建议。
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上善若水，水善利万物而不争
2楼2011-05-16 15:57:48
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a240188

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by a240188 at 2011-05-16 15:44:50:
如题~急用，请各位万能的虫友解决我的燃眉之急，谢谢~

我想问酶类药物的一般分离纯化过程，谢谢！
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3楼2011-05-16 16:06:30
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a240188

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by newtime007 at 2011-05-16 15:57:48:
你是蛋白还是大分子化合物
蛋白的话先跑凝胶，判断出分子量的大小，在进一步选凝胶柱分离。
大分子化合物的话，因该知道分子大小和极性吧，分离用树脂柱和硅胶柱，最后用色谱吧。
由于你没说清楚问题，不能给与 ...

我想问的是关于酶类药物的一般分离纯化过程，谢谢！
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4楼2011-05-16 16:19:12
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newtime007

木虫 (正式写手)

成长的微生物

【答案】应助回帖

如果是胞外酶处理步骤少些，不用破细胞。
一般步骤为：获取菌体，PB清洗2到3次，超声破碎，离心取上清就为酶液
，硫酸铵沉淀，或超滤浓缩，色谱柱纯化。
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上善若水，水善利万物而不争
5楼2011-05-16 16:41:10
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