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爱丽莎

新虫 (初入文坛)

[求助] 用FITC测纳米颗粒表面氨基

想测下纳米颗粒的表面氨基

用了过量的FITC，在常温下跟一定量的颗粒在0.2 M PH 8.6的缓冲液里反应了两小时。
之后离心取上清液去测。对比配在同样缓冲液里的标准曲线算出数值。
FITC溶液都是放在96孔板里，每个样品四个孔，然后用microplate reader测的。
用了以前师兄存的方法。激发480-710，发射580-720.
但是用标准曲线算出来的上清液里的FITC量一直比加进去的多。测了三次都是这种情况。

不知道这样做有什么问题吗？求指点。谢谢！
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1楼 2011-05-13 09:37:05
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zdy1398

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
爱丽莎(金币+1): 谢谢回帖！ 2011-05-13 10:31:22
wandaohzl(金币+1): 鼓励交流 2011-05-13 11:05:35
FITC的荧光是受其结构的影响，你的FITC的标准曲线可能不可靠
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2楼2011-05-13 10:00:04
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爱丽莎

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by zdy1398 at 2011-05-13 10:00:04:
FITC的荧光是受其结构的影响，你的FITC的标准曲线可能不可靠

那有什么好的建议么？如何才能保证结构不受影响呢？
我之前只是用了同样的缓冲液。
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3楼2011-05-13 10:33:46
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zdy1398

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
nuaajsh(金币+1): 谢谢参与。 2011-06-15 22:20:30
没用过 microplate reader 这么高端的机器，不了解为什么激发波是480~710？而不固定在495？多再做几次吧
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4楼2011-05-13 14:03:11
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