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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药剂学 » 求助关于薄层分析的问题
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祝福科科

木虫 (小有名气)

[求助] 求助关于薄层分析的问题

我的样品是叶酸与另外物质偶联而成的，用薄层鉴定是否偶联成功，采用的是硅胶GF254自制的薄层板，以叶酸为对照品，最后在365nm紫外等下观察斑点，样品与叶酸都出现一个斑点，Rf值大致相同，大概放置半个小时左右之后，我的样品出现另外一个斑点，但是叶酸标准品没有，这个新斑点是偶联成的吗？为什么放置一段时间之后才可以显现出斑点？
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huxiasoar

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好好学习
1楼 2011-05-12 22:24:13
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caizhengjun

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
祝福科科(金币+2): 2011-05-13 11:11:36
中药2000(金币+1): 沙发奖励。 2011-05-14 20:06:35
样品与叶酸都出现一个斑点，Rf值大致相同，说明样品中还有叶酸，拎一个斑点Rf多少？应该就是你要的偶联化合物。可能显色需要时间。
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既然选择走上科研道路，就要学会坚强！
2楼2011-05-13 09:06:31
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wanyiku

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
祝福科科(金币+4): 2011-05-13 11:11:11
祝福科科(金币+1): 2011-05-14 19:53:39
中药2000(金币+2): 热心助人。 2011-05-14 20:06:48
首先，要确认你所选择的展开剂能把你的样品（欧联成功的那个东西）展开。

那么可以分成两种情况：
1. 如果偶联成功，应该有两个斑点，多余的叶酸也会出现斑点
2. 如果偶联不成功，样品只有一个点，既是叶酸的点。两个Rf值应该一样。

有没有偶联剂？有，是什么偶联剂？偶联剂能显色吗?最后出现的斑点Rf值如果和前两个Rf值有明显的差别，排除偶联剂，应该就是偶联成功。
还有一个方法可以检测，紫外光谱扫描一下
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加油，你是最棒的
3楼2011-05-13 10:13:36
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sally88814

荣誉版主 (文坛精英)

优秀版主

【答案】应助回帖

祝福科科(金币+3): 2011-05-13 11:11:55
LZ有没吹干在去看的呢，在点一次样看看，事先都得吹干，看的时候也吹干看看！
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4楼2011-05-13 10:22:50
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祝福科科

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by wanyiku at 2011-05-13 10:13:36:
首先，要确认你所选择的展开剂能把你的样品（欧联成功的那个东西）展开。

那么可以分成两种情况：
1. 如果偶联成功，应该有两个斑点，多余的叶酸也会出现斑点
2. 如果偶联不成功，样品只有一个点，既是叶酸的 ...

虽然不能确定展开剂能否完全展开，但是：
偶联剂在365nm波长没有吸收，溶剂是DMSO，在365nm紫外灯下反应体系里显现亮斑的只有叶酸,所以后来另一个亮斑应该就是叶酸。既然叶酸有两个亮斑，那么就应该是叶酸的极性发生改变了，那就表明已经偶联成功一部分，这样分析对吗？
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好好学习
5楼2011-05-13 11:10:57
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祝福科科

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by sally88814 at 2011-05-13 10:22:50:
LZ有没吹干在去看的呢，在点一次样看看，事先都得吹干，看的时候也吹干看看！

我没吹，只是拿出来5分钟左右就在紫外灯下观察了，但是为什么叶酸这时候就能显现亮斑呢？
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好好学习
6楼2011-05-13 11:13:27
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wanyiku

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
xiaodu2007693(金币+1): 谢谢 2011-05-15 15:55:23
引用回帖:
Originally posted by 祝福科科 at 2011-05-13 11:10:57:
虽然不能确定展开剂能否完全展开，但是：
偶联剂在365nm波长没有吸收，溶剂是DMSO，在365nm紫外灯下反应体系里显现亮斑的只有叶酸,所以后来另一个亮斑应该就是叶酸。既然叶酸有两个亮斑，那么就应该是叶酸的极 ...

我认为不对，你不可能把叶酸完全耦合完，如果偶联成功，样品必然有两个斑点，其中有一个斑点的Rf值必然和你的叶酸标准品的Rf值接近，这样才能说明有可能偶联成功，至于为啥要过一段时间才能显色，我也不知道该怎么样解释。你的TLC上一共有几个点？你比较一下他，它们的Rf值拉
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加油，你是最棒的
7楼2011-05-13 17:08:24
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祝福科科

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by wanyiku at 2011-05-13 17:08:24:
我认为不对，你不可能把叶酸完全耦合完，如果偶联成功，样品必然有两个斑点，其中有一个斑点的Rf值必然和你的叶酸标准品的Rf值接近，这样才能说明有可能偶联成功，至于为啥要过一段时间才能显色，我也不知道该 ...

我的样品总共两个斑点，一个与叶酸Rf值相近，而叶酸只有一个斑点。
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好好学习
8楼2011-05-13 19:01:16
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wanyiku

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 祝福科科 at 2011-05-13 19:01:16:
我的样品总共两个斑点，一个与叶酸Rf值相近，而叶酸只有一个斑点。

这就对了，说明你很有可能耦合成功了啊
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加油，你是最棒的
9楼2011-05-13 21:44:30
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祝福科科

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by wanyiku at 2011-05-13 21:44:30:
这就对了，说明你很有可能耦合成功了啊

谢谢
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好好学习
10楼2011-05-14 19:53:05
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