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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助 直接法提取沉积物DNA怎样超过20kb
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疯狂修行者

木虫 (正式写手)
不知道你为什么要提大的？你要干什么用？你目标不就是提取DNA吗？那下一步干什么？如果是PCR，你就批一下，能拿到目的条带就可以了。如果要做基因组测序，那离心机都搞不定，开来做不了。不用每不实验都那么苛刻的要求，达到目标就可以了。
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戒骄戒躁，坦荡做人，平常心做事，享受生活之美！！
11楼2011-05-13 10:46:48
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xintutiao

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2011-05-12 21:08:11:
你跑电泳时用的估计是实验室很小的那种电泳槽，胶板，这样的胶分辨率根本不行。

如果要想分离大片段的，就得跑脉冲场电泳。其实你看到的20kb左右的里面包含大片

段的，当然也包含一些10几kb的，分不开的。

恩 是用的凝胶电泳 比较小 谢谢这位大侠的指点啦 不知道在跑电泳前 提取的过程中有没有什么能够改进从而增大提取片段的方法呢
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12楼2011-05-13 14:13:34
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xintutiao

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by cdl007 at 2011-05-13 05:34:45:
要看浓不浓
要是DNA量够多的话，给你支一损招，裂解完了，DNA沉淀那步（就是用到超速离心机的那步）直接用无菌牙签挑出来，放到另一管里，低速离离，干燥就能用了

如果你量少的话。。。。有点头痛了

(⊙o⊙)…  貌似没这么多的量 挑不出来…………
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13楼2011-05-13 14:17:09
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xintutiao

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by shaquila at 2011-05-13 10:12:07:
http://en.wikipedia.org/wiki/Pulsed_field_gel_electrophoresis
如上所示

恩 好 谢谢啦 学习学习
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14楼2011-05-13 14:18:54
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
西瓜(金币+3): 很有经验啊~ 2011-05-13 18:02:03
引用回帖:
Originally posted by xintutiao at 2011-05-13 14:13:34:
恩 是用的凝胶电泳 比较小 谢谢这位大侠的指点啦 不知道在跑电泳前 提取的过程中有没有什么能够改进从而增大提取片段的方法呢

注意一些细节的东西，枪尖要剪掉，动作要轻柔，避免剧烈震荡
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The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
15楼2011-05-13 16:36:08
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