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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 我的胶又悲剧了啊，急求帮助
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叶风and花影

银虫 (小有名气)

[求助] 我的胶又悲剧了啊，急求帮助

今天又打算跑电泳的，可制胶的时候堆积胶死活凝不好（下面部分凝了，插梳子部分没凝好，梳子拔出泳道就没了），做了两次都不行
配的ABC液保证没问题，前两天做了也都ok的，我查了好多都说是AP的问题，可我的AP是现配的，量也正常，TEMED量也够的，怎么就凝不起来呢，急需求解啊，哪位大虾帮帮忙啊~~
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安静的巷口~仰望幸福
1楼2011-05-12 15:15:22
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

【答案】应助回帖

叶风and花影(金币+1): 请问制胶用纯净水代替双蒸水，ok不？ 2011-05-12 16:07:14
从各个环节找问题，总可以找到的。。。
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Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
2楼2011-05-12 15:38:17
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小虫子666

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

叶风and花影(金币+1): temnd已经比标准的多加了的，5555 2011-05-12 17:19:07
引用回帖:
Originally posted by 叶风and花影 at 2011-05-12 15:15:22:
今天又打算跑电泳的，可制胶的时候堆积胶死活凝不好（下面部分凝了，插梳子部分没凝好，梳子拔出泳道就没了），做了两次都不行
配的ABC液保证没问题，前两天做了也都ok的，我查了好多都说是AP的问题，可我的AP ...

天热了，胶应该凝的更快。 多加点TEMED试试
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3楼2011-05-12 17:16:48
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314300420

捐助贵宾 (著名写手)

【答案】应助回帖

叶风and花影(金币+1): APS没问题的，实验室其他人用的都ok的啊，我只能再试试了~~3q 2011-05-12 18:35:10
能凝一部分，说明还有希望，将APS加倍试试。你说是新配的，可能你的APS固体就已经变质了。
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4楼2011-05-12 17:33:38
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gaoyang636

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

叶风and花影(金币+2): 恩好，我试试吧 2011-05-13 10:10:50
TEMED虽然RT保存，但是还是最好遮光4度放置，这东西也容易失效。你配好胶，放37度恒温箱试试，可以加速凝胶
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5楼2011-05-13 09:18:50
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小新3858

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

叶风and花影(金币+1): 我要锲而不舍的试，并且找原因，哈哈，3q 2011-05-13 10:11:22
一般胶不凝是因为温度低、APS或TEMED量不够，现在来看应该不是温度的问题，可能是APS或TEMED的量不够，把两种东西的量再加大点试试
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6楼2011-05-13 09:19:37
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路人甲007

木虫 (正式写手)

小七

【答案】应助回帖

★ ★
silicare(金币+2, EPI+1): 思路很好 2011-05-13 13:36:30
你分离胶能够凝而你浓缩胶不凝  说明你的AP TEMED是没有问题的（前提是都是用的一起配的AP TEMED）
那唯一的区别就在浓缩胶buffer上了   浓缩胶buffer的影响因素就在pH值了
所以  你要确定你配的浓缩胶buffer是不是正确了
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与人玫瑰手有余香
7楼2011-05-13 13:08:31
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叶风and花影

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 路人甲007 at 2011-05-13 13:08:31:
你分离胶能够凝而你浓缩胶不凝  说明你的AP TEMED是没有问题的（前提是都是用的一起配的AP TEMED）
那唯一的区别就在浓缩胶buffer上了   浓缩胶buffer的影响因素就在pH值了
所以  你要确定你配的浓缩胶buffer是 ...

哎哟喂，麻烦你再发个帖吧，不然我没法给你评分了，呵呵3q
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安静的巷口~仰望幸福
8楼2011-05-16 19:51:00
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路人甲007

木虫 (正式写手)

小七

【答案】应助回帖

叶风and花影(金币+2): 嘿嘿，谢啦 2011-05-17 10:12:04
你分离胶能够凝而你浓缩胶不凝  说明你的AP TEMED是没有问题的（前提是都是用的一起配的AP TEMED）
那唯一的区别就在浓缩胶buffer上了   浓缩胶buffer的影响因素就在pH值了
所以  你要确定你配的浓缩胶buffer是不是正确了
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与人玫瑰手有余香
9楼2011-05-16 22:07:13
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cjsgege

新虫 (初入文坛)
很简单，所有的重新配，就好了！
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10楼2013-03-30 22:20:37
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