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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 克隆基因和载体连接后转化至大肠杆菌，为什么每次涂板都是空平板没有菌落？
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xiongyaoling

金虫 (小有名气)
个人认为问题出在连接环节
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11楼2012-05-12 10:01:20
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damaomao

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
12楼2012-05-12 10:35:25
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wangmin2010

新虫 (小有名气)
我遇到的情况和楼主的一样，也是转化后一个菌也没长，你的现在连上了吗？
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自己的人生是要靠自己改变的！
13楼2012-07-31 20:57:31
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wangmin2010

新虫 (小有名气)
我的现在也没连上呢，愁死了
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自己的人生是要靠自己改变的！
14楼2012-07-31 20:57:53
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rong207787

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
98434楼: Originally posted by zhaoxinrui0511 at 2011-04-24 18:42:36
小弟快崩溃了，请大家帮帮忙：
目的基因经PCR扩增后（引物上分别加入：Nco I和Xba I酶切位点）和T载体相连，经测序验证序列唔错，之后从T载体上用Nco I和Xba I双酶切重新获得了目的基因（酶切产物的纯化采用宝生物 ...

你的问题解决了吗？
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15楼2012-10-12 12:14:31
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lcu0919

金虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by xiaoyu1014126 at 2011-04-24 23:03:27
1. 感受态的问题。可以感受态直接涂平板看看感受态怎么样，空质粒也可以转一下，看看长不长。确定是不是感受态的问题
2.抗生素种类和浓度

感受态涂哪一种平板
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敢想，敢拼！
16楼2013-05-22 11:05:09
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灰灰，加油！

新虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by chchen123 at 2012-05-06 20:20:38
我也做的乳酸乳球菌，用8148表达，现在大肠杆菌里表达，连接的板子长了，质粒也提出来了，就是切不开啊，楼主连上没呢？请教一下

你的抗生素怎么加的？
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17楼2017-09-26 09:56:55
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liguosi1234

木虫 (小有名气)
引用回帖:
13楼: Originally posted by wangmin2010 at 2012-07-31 20:57:31
我遇到的情况和楼主的一样，也是转化后一个菌也没长，你的现在连上了吗？

我也是同样的情况，重组酶、引物、体系啥都变过，就是一颗都不长，请问你们最后怎么解决的
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18楼2021-11-11 14:13:25
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