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haoci

铜虫 (初入文坛)

[求助] 急求!设计一个生化分子的实验方法

1. 科学家新发现了某编码蛋白质的内源基因X,已得到X的完整基因序列。
A.请从序列入手分析其表达产物的功能,请列出可采用的方法及步骤。(4分)
B.上述分析表明X可能编码了一个DNA结合蛋白,那么它可能具有什么结构,试举3种。(6分)
C.请设计实验验证X是否是DNA结合蛋白(10分)

2.蛋白A和蛋白B,请设计实验研究它们之间的相互作用(10分),假设发现A与B相互作用,设计进一步的实验寻找蛋白A上与B作用的特定区域(10分)。
急求急求!
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bst5

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
西瓜(金币+6, EPI+1): good! 2011-04-22 17:36:38
A:可以通过基因序列找出蛋白质序列,在NCBI上以及以及序列分析网站,可以得到蛋白质序列的特征结构,从而预测蛋白质的功能
B:如果是DNA结合蛋白,那么很可能是转录因子,转录因子可能的结构有螺旋-环-螺旋,锌指,亮氨酸拉链
C:EMSA,ChIP,CAST实验可以验证是否为转录因子
2:蛋白质与蛋白质之间的相互作用可以用IP(免疫沉淀)和酵母双杂交来验证
具体的实验方法,LZ可以自己具体找一下。
3楼2011-04-22 17:15:33
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zxy7576

新虫 (小有名气)

考研复试的题吗?
不论什么时候,什么处境,都不要忘记自己最初的梦想!
2楼2011-04-22 13:16:37
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beibei9535

荣誉版主 (职业作家)

晕晕小版主~ 姑娘你好!

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
dhd997(金币+5, EPI+1): 再接再厉! 2011-04-23 13:14:04
引用回帖:
Originally posted by haoci at 2011-04-21 15:43:09:
1. 科学家新发现了某编码蛋白质的内源基因X,已得到X的完整基因序列。
A.请从序列入手分析其表达产物的功能,请列出可采用的方法及步骤。(4分)
B.上述分析表明X可能编码了一个DNA结合蛋白,那么它可能具有 ...

啊哈哈,不知道该不该帮你呀。
这些考试题。。
题目质量挺好的,科院的吧。

A 从序列出发,生物信息学。
   NCBI核酸BLAST确定大概是什么基因。
   基因转化为氨基酸序列。软件找到ORF(很多软件的呀,bioedit也行)
   NCBI--CDD找到保守区。
   差不多就知道什么功能了。呵呵
B 呵呵,这些结构生化分子书上很多讲解的,不详细说了。
  螺旋,转角,亮氨酸拉链。
C 利用酵母单杂交体系筛选DNA结合蛋白质
一般是用利用EMSA和PCR技术结合使用。

2.蛋白A和蛋白B,请设计实验研究它们之间的相互作用(10分),假设发现A与B相互作用,设计进一步的实验寻找蛋白A上与B作用的特定区域(10分)。

基础知识吧,DNase Ⅰ敏感性分析、体外和体内足迹分析等技术,
最常用的是Elisa...
还有很多吧,看分子书。
最好的年龄是,那一天,终于知道并且坚信自己有多好,不是虚张,不是夸浮,不是众人捧,是内心明明澈澈知道:是的,我就是这么好。
5楼2011-04-23 13:12:44
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