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light__sun

木虫 (小有名气)

[求助] 高速逆流色谱分配系数的测定

我现在想在HPLC上测定逆流色谱的溶剂体系的分配系数,请问,这里对HPLC的柱子应该没什么要求吧?另外,测定分配系数的要注意什么?一般的步骤是什么?(步骤越详细越好)
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ss0128

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

light__sun(金币+5): 2011-04-25 12:32:17
柱子能够对你的待测物质有足够的分离度就行了
最好是你的待测组分能够达到基线分离
比如说 有10种组分需要做分配系数 那就10种组分两两基线分离
保证柱子的状态比较稳定就行了

用面积归一化法 或是直接比较两相中每种物质的峰面积就可以了
分配系数=组分在上相中的峰面积/组分在下相中的峰面积
2楼2011-04-25 09:50:13
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真爱至上青青

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

light__sun(金币+1): 2011-05-07 15:32:20
如果一个溶剂体系上下相体积比不为1,那分配系数还能直接是峰面积比吗?
我测定分配系数的时候是首先配好溶剂体系,控制在10ml左右,然后把样品加入里面,充分振荡分配,然后倒入分液漏斗,分别取上下相,然后进液相测峰面积。
恳请逆流色谱高手们指点下,这样做是否正确。谢谢啦~~
3楼2011-05-07 09:16:24
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真爱至上青青

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

light__sun(金币+1): 2011-05-08 11:13:29
请教了做逆流的老师,说我这种方法是可以的,分配系数是浓度之比,不是质量比
4楼2011-05-07 20:44:30
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whblovedj

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

light__sun(金币+5): 2011-05-10 14:48:55
light__sun(金币+18): 1 2011-05-14 14:51:02
测定分配系数目的就是为进一步做HSCCC分离选择合适的两相溶剂体系。当所测得的分配系数在0.5-5之间是,一般是有利于分离的。另外还要保证所分离的几种物质的分配系数K要有一定的差异。比如对于A和B两种物质而言,KA/KB大于1.2 才有利于分离。
测定分配系数一般按下面的步骤进行:1.准确称取样品。2. 用已经分配平衡的下相溶解样品。3 .过滤除去不容物。4.加入等体积的上相,震荡,分配平衡。5.用HPLC测定物质在上下相的峰面积。6.计算分配系数K=A1/A2
5楼2011-05-09 21:21:14
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