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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】大肠杆菌转化质粒，出来的不是我要的了，怎么回事？
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xiaoyu1014126

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by beibei9535 at 2011-04-15 09:43:14:
我不知道能不能解决你的问题。
1 本来重组质粒就是难转化。还有的转化进去了结果拷贝数低。建议你先在TOP10中扩增质粒，然后再化转或者电转质粒，会比较好。
2 质粒是否与marker对应关系，记得使用的marker是质 ...

非常感谢你的指导，我的问题已经解决了，是我杞人忧天了，呵呵，其实大小是对的，酶切验证过了
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11楼2011-04-15 12:52:46
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panda73

金虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
wanhscn(金币+3): 鼓励新虫友发帖！ 2011-12-04 08:49:02
引用回帖:
1楼: Originally posted by chui2004 at 2011-04-12 22:00:44:
最近在做质粒构建的工作，当没有完成最终构建之前，质粒DNA转化大肠杆菌都很正常，而且很容易转化成功，但是将质粒构建成功后，转化大肠杆菌变得非常困难，而且DH5a转不进去;JM109，TOP10转入后，跑电泳比我的目的 ...

推测是已经发生了重组
赞一下(2人) 回复此楼
12楼2011-12-04 00:40:34
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kenan8848

新虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
是不是构建的时候载体切坏了，可能不影响克隆表达，但一些不必要的序列没了，可能也会影响大小
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真相只有一个
13楼2012-02-14 10:38:31
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路程

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
现在问题解决了吗，我也碰到类似的问题，请教你是怎么解决的呢？
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14楼2012-09-20 21:36:29
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