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hebeilisbi

铁虫 (小有名气)

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[交流] 【求助】液相中的波长是根据什么设定的？已有15人参与

液相中的波长是根据什么设定的？一旦设定好后波长就固定了主要成分在这个波长下有最大吸收

那其他的组分如杂质在此波长下不会有最大吸收那么检测出来的图谱怎会会准确？或者是"公平“？（装有紫外检测器的色谱仪）

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1楼 2011-04-11 11:57:46

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crity328

至尊木虫 (著名写手)

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波长的选择由于涉及到各被检测物质在该波长下的响应因子是否相同,（即所谓的重量校正因子）,因此也是一个非常重要的因素。通常应选取主成分与各中间体(即各杂质)紫外吸收强度相近的波长(即f在08至1.2之间）, 可采用分别配制相同浓度的主成分与各中间体的溶液, 通过紫外分光光度仪进行紫外扫描的方法进行确定, 同时将此各溶液分别注人液相色谱仪, 验证其峰面积的大小是否一致以及各保留时间是否有差别, 如此便可消除重量校正因子的计算, 达到简便、快速、准确地评价。若选取各杂质紫外吸收强度远大于或远小于主成分紫外吸收强度的波长时（即f小于0.8或f大于1.2）, 因测得的杂质量不能如实反映实际量, 如不加校正因子将得到错误的结果。
详细请参考谢沐风老师的《如何建立HPLC法测定有关物质的方法》这篇文章。