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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 【求助/交流】奥林巴斯cx31显微镜配上CCD后能否用于计数处于分裂期的微囊藻细胞
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哈哈稀奇

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】奥林巴斯cx31显微镜配上CCD后能否用于计数处于分裂期的微囊藻细胞

向大家请教了， 我研究的关于蓝藻的问题其中有一项要计算处于分裂期的微囊藻的个数占总数的频率（即处于分裂期能看到两个细胞中间横膜的那种），实验室用的是奥林巴斯cx31显微镜，除了100的放大倍数外，最高只有40的放大倍数，这样观察效果很不好，基本很难分辨出来。   我们之前没有用过CCD  ，现在考虑购买。但是不知道效果会如何？？用了CCD后，会不会比直接目视效果好？还是只是在电脑上看着方便点？
请大家指点指点啊， 非常感谢。
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1楼 2011-04-10 22:23:30
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yanyading

金虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★
rainwander(金币+5, EPI+1): 很好，鼓励~~ 2011-04-11 11:26:56
哈哈稀奇(金币+10): 谢谢啊 建议得很详细啊 2011-04-11 15:12:17
我也尝试回答一下显微镜的问题：）

>> 实验室用的是奥林巴斯cx31显微镜，除了100的放大倍数外，最高只有40的放大倍数，这样观察效果很不好，基本很难分辨出来。   

CCD的视场往往比较小，比如1/2的黑白CCD，单个长宽之和才半个英寸，大约8*5MM的样子，目镜的视场，以10X目镜来说，起码直径是20MM，普通级别物镜的可用视场，据我的经验，起码也有个15MM，所以即使是最差的物镜，配CCD也是搓搓有余了，但是其采集的范围是只有10X目镜目视的中央大约1/4面积。物镜很贵，特别是非常见的倍率。

>> 我们之前没有用过CCD  ，现在考虑购买。但是不知道效果会如何？？
建议不买彩色的，买黑白的，为什么呢？因为CCD本身就是黑白的，彩色的只是把一个田字格里面的4个黑白像素表面，涂上4种颜色的透明膜，然后把4个像素的信号用来计算，得出彩色值，所以，就获得图像来说，彩色的CCD有点浪费资源，平时你看彩色CCD出来不少的噪点，也是因为中间有了一个采样计算过程造成的。

参看这个 http://article.pchome.net/content-8400.html
http://img.article.pchome.net//00/01/09/50/sony_rgbe[1].gif

>> 用了CCD后，会不会比直接目视效果好？还是只是在电脑上看着方便点？
如果你用黑白，或许会比目视好，因为你可以使用深蓝色滤光片，甚至使用近紫外光进行成像，因为这种方式使得光的波长大大变短，提高物镜的分辨率，您知道的，波长越短，绕射能力越小，本来黄光（长波长的光线）绕过的小直径物体，但是深蓝光一去，就可以被发现了，但是如果你用眼睛看这种颜色的光线，就觉得非常不舒服（看一会儿就要呕吐的，而且对眼睛有伤害的），但是CCD确能够“看”清楚。
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5楼2011-04-11 10:12:01
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)
★ ★
rainwander(金币+2, EPI+1): 鼓励交流！！！ 2011-04-11 00:02:51
哈哈稀奇(金币+8): 非常感谢你的建议 2011-04-11 09:44:48
哈哈稀奇(金币+10): 谢谢啊 我完全不懂 靠大家多多指点 2011-04-11 15:16:51
引用回帖:
Originally posted by 哈哈稀奇 at 2011-04-10 22:23:30:
向大家请教了， 我研究的关于蓝藻的问题其中有一项要计算处于分裂期的微囊藻的个数占总数的频率（即处于分裂期能看到两个细胞中间横膜的那种），实验室用的是奥林巴斯cx31显微镜，除了100的放大倍数外，最高只 ...

CCD再好也比不上目视，信息多一层处理就丢失一些，这个是肯定的。
CCD的好处是可以拍照和拍视频。照片拍下来后可以进行各种处理，现在CCD配套的软件功能都很强大，发表文章可以多很多漂亮的图片。
很多软件可以计数的，如菌落计数，但是楼主说的情况个人认为现在的软件还很难实现。但是照片拍下来，还是可以人工计数的。

小结：CCD还是很有必要买滴。

P.S. 奥林巴斯还有50倍的物镜，可以考虑。
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2楼2011-04-10 23:04:18
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哈哈稀奇

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by 西瓜 at 2011-04-10 23:04:18:
CCD再好也比不上目视，信息多一层处理就丢失一些，这个是肯定的。
CCD的好处是可以拍照和拍视频。照片拍下来后可以进行各种处理，现在CCD配套的软件功能都很强大，发表文章可以多很多漂亮的图片。
很多软件可 ...

谢谢你提供的建议
但是  我有点不太清楚 你说的“CCD再好 也比不上目视 ”这句话  。  比不上是什么程度 ？ 还有，如果考虑到 眼睛的视疲劳呢？    由于我没用过CCD  所以 还麻烦多多指教    非常的谢谢了
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3楼2011-04-11 09:48:40
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)
引用回帖:
Originally posted by 哈哈稀奇 at 2011-04-11 09:48:40:
谢谢你提供的建议
但是  我有点不太清楚 你说的“CCD再好 也比不上目视 ”这句话  。  比不上是什么程度 ？ 还有，如果考虑到 眼睛的视疲劳呢？    由于我没用过CCD  所以 还麻烦多多指教    非常的谢谢了

比不上是指清晰度啦。CCD多少会损失一些细节的，但只要放大倍数够，精度能满足要求的。眼睛疲劳确实是个问题，用CCD把照片拍下来，可以随时看，也不怕疲劳，呵呵。
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4楼2011-04-11 10:04:22
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