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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助】目的片段短易引发错配？
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lhm_hnyj

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】目的片段短易引发错配？

如题，是这样的吗？目的片段100bp和300bp左右，经常出现本不该有的阳性扩增条带，确认了不是污染引入的。
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1楼 2011-04-08 08:20:23
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)
★
lhm_hnyj(金币+1):谢谢参与
引物短是相对容易错配，目的片段短倒不至于啦。
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2楼2011-04-08 09:11:23
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yabxxh

木虫 (正式写手)
★
lhm_hnyj(金币+1):谢谢参与
错不错配跟酶有关系，非特异扩增和你的引物、PCR条件以及TM有关系，呵呵
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3楼2011-04-08 09:22:59
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jhu132llh

荣誉版主 (知名作家)
★
lhm_hnyj(金币+1):谢谢参与
是的
目的片段短与非特异性带没关系的
但是引物是有可能引物错配的
你的目的片段是100左右的话倒是要考虑一下引物的二聚体也会有50大小的
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4楼2011-04-08 12:03:09
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睡着数绵羊

银虫 (小有名气)
★
lhm_hnyj(金币+1):谢谢参与
是不是因为引物没有设计好啊，应该很好做的。
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5楼2011-04-08 13:26:05
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lhm_hnyj

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 睡着数绵羊 at 2011-04-08 13:26:05:
是不是因为引物没有设计好啊，应该很好做的。

应该是引物问题，电泳结果中引物二聚体没少见
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6楼2011-04-09 21:12:22
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