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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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guanjinke

银虫 (小有名气)


[交流] 【求助】PCR

各位前辈:PCR扩出的条带比目的条带要短好多,这是为啥呢?谢谢
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guanjinke(金币+1): 2011-04-03 23:44:21
guanjinke(金币+2): 2011-04-25 21:07:54
莫非是非特异扩增吗,或是引物有特意结合位点?楼主可以检查一下引物!
2楼2011-04-03 22:25:34
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guanjinke

银虫 (小有名气)


莫非是非特异扩增吗,或是引物有特意结合位点?楼主可以检查一下引物!
这是不是说引物不行?还有就是怎么检查引物有特意结合位点?谢谢
3楼2011-04-03 23:46:41
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guanjinke(金币+2): 2011-04-25 21:08:07
引用回帖:
Originally posted by guanjinke at 2011-04-03 23:46:41:
莫非是非特异扩增吗,或是引物有特意结合位点?楼主可以检查一下引物!
这是不是说引物不行?还有就是怎么检查引物有特意结合位点?谢谢

是不是引物在除了楼主想要的区段扩增外,还会在其他区段有结合位点呢?楼主的目的片段多长?扩出来的多长?延伸时间是?
4楼2011-04-03 23:53:11
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guanjinke

银虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by blackrose8089 at 2011-04-03 23:53:11:
是不是引物在除了楼主想要的区段扩增外,还会在其他区段有结合位点呢?楼主的目的片段多长?扩出来的多长?延伸时间是?

目的片段1200,扩出来的有700多,延伸时间是8分钟。
5楼2011-04-04 08:59:46
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guanjinke(金币+1): 2011-04-04 11:43:36
guanjinke(金币+1): 2011-04-04 11:43:56
引用回帖:
Originally posted by guanjinke at 2011-04-04 08:59:46:
目的片段1200,扩出来的有700多,延伸时间是8分钟。

楼主的延伸时间太长了些,个人认为很有可能是引物有非特异结合位点,建议楼主再看一下序列和引物,扩增的片段不长应该挺好扩的.祝楼主顺利!
6楼2011-04-04 09:40:39
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guanjinke(金币+1): 2011-04-04 11:43:43
按说8分钟也不断了
1000左右的能P出来的
引物做一下检测吧
可能是非特异性的
7楼2011-04-04 09:49:23
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