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guanjinke

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助】PCR

各位前辈：PCR扩出的条带比目的条带要短好多，这是为啥呢？谢谢
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1楼 2011-04-03 22:17:19
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)
guanjinke(金币+1): 2011-04-03 23:44:21
guanjinke(金币+2): 2011-04-25 21:07:54
莫非是非特异扩增吗，或是引物有特意结合位点？楼主可以检查一下引物!
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2楼2011-04-03 22:25:34
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guanjinke

银虫 (小有名气)
莫非是非特异扩增吗，或是引物有特意结合位点？楼主可以检查一下引物!
这是不是说引物不行？还有就是怎么检查引物有特意结合位点？谢谢
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3楼2011-04-03 23:46:41
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)
guanjinke(金币+2): 2011-04-25 21:08:07
引用回帖:
Originally posted by guanjinke at 2011-04-03 23:46:41:
莫非是非特异扩增吗，或是引物有特意结合位点？楼主可以检查一下引物!
这是不是说引物不行？还有就是怎么检查引物有特意结合位点？谢谢

是不是引物在除了楼主想要的区段扩增外，还会在其他区段有结合位点呢？楼主的目的片段多长？扩出来的多长？延伸时间是？
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4楼2011-04-03 23:53:11
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guanjinke

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by blackrose8089 at 2011-04-03 23:53:11:
是不是引物在除了楼主想要的区段扩增外，还会在其他区段有结合位点呢？楼主的目的片段多长？扩出来的多长？延伸时间是？

目的片段1200，扩出来的有700多，延伸时间是8分钟。
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5楼2011-04-04 08:59:46
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)
guanjinke(金币+1): 2011-04-04 11:43:36
guanjinke(金币+1): 2011-04-04 11:43:56
引用回帖:
Originally posted by guanjinke at 2011-04-04 08:59:46:
目的片段1200，扩出来的有700多，延伸时间是8分钟。

楼主的延伸时间太长了些，个人认为很有可能是引物有非特异结合位点，建议楼主再看一下序列和引物，扩增的片段不长应该挺好扩的.祝楼主顺利！
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6楼2011-04-04 09:40:39
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jhu132llh

荣誉版主 (知名作家)
guanjinke(金币+1): 2011-04-04 11:43:43
按说8分钟也不断了
1000左右的能P出来的
引物做一下检测吧
可能是非特异性的
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7楼2011-04-04 09:49:23
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