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A total of 2 μg of aRNA from the tumor biopsies and 25 μg of pooled normal total RNA from matched normal samples were reverse transcribed using Superscript II (Invitrogen) and random primers (Invitrogen) for biopsy samples or oligo- d(T)20VN (Invitrogen) for pooled normal specimens in the presence of Cy5-dCTP or Cy3-dCTP (PerkinElmer Life and Analytical Sciences). Following direct labeling, the two cDNA probes were purified using a PCR Purification Kit (Qiagen) and hybridized for 20 hours at 50○C to a microarray slide. The slides were washed, dried, and scanned at 532nm and 635nm using a Scan Array Lite (PerkinElmer Life and Analytical Sciences, Boston, MA). |
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2楼2011-04-01 20:11:33
xiaotangren(金币+20, 翻译EPI+1): 谢谢你拉 2011-04-05 08:51:11
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由于混合的正常标本在 Cy5-dCTP or Cy3-dCTP(PerkinElmer Life and Analytical Sciences)面前，通过使用Superscript II (表达载体)和随机引物(表达载体)，为得到活检标本或者低聚糖样品20VN（表达载体），一共有从肿瘤活检的2μgaRNA和从匹配的正常样品的25μg正常总RNA被反转录。 接着直接标记，这两个互补DNA样品被净化，通过PCR提纯设备和在50℃下，20小时混合于基因芯片载玻片上。 这个载玻片需要清洗、干燥和在532nm和635nm条件下利用Scan Array Lite进行扫描。(PerkinElmer Life and Analytical Sciences,Boston, MA). 翻译了下，供参考  |
3楼2011-04-03 17:41:42
好，
楼上好强 4楼2011-04-03 17:54:42
5楼2011-04-11 09:00:38
