应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助/交流】提RNA后用DNase消化后PCR仍有目的条带，该如何避免呢？
汕头大学海洋科学接受调剂
141/1返回列表
查看: 1778  |  回复: 13
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

nininini

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】提RNA后用DNase消化后PCR仍有目的条带，该如何避免呢？

回复此楼

» 猜你喜欢

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-03-31 21:29:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaoyang636

木虫 (著名写手)
★
nininini(金币+1):谢谢参与
啥意思？你提了RNA，然后反转了么？还是直接拿RNA去跑PCR?
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-03-31 21:58:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

65900931

银虫 (小有名气)
★
nininini(金币+1):谢谢参与
1.水+反应体系
2.DNase消化后的RNA+反应体系

对比一下看看。
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2011-03-31 23:18:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

郝钊

金虫 (小有名气)
★
nininini(金币+1):谢谢参与
DNA酶消化过的RNA中如果存在可以退火的片段，一样可以P出条带来。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-04-01 00:16:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nininini

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by gaoyang636 at 2011-03-31 21:58:37:
啥意思？你提了RNA，然后反转了么？还是直接拿RNA去跑PCR?

直接用RNA跑的PCR，理论不应该有目的产物的啊~
赞一下 回复此楼
5楼2011-04-01 09:16:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nininini

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by gaoyang636 at 2011-03-31 21:58:37:
啥意思？你提了RNA，然后反转了么？还是直接拿RNA去跑PCR?

直接用RNA跑的PCR，理论不应该有目的产物的啊~
赞一下 回复此楼
6楼2011-04-01 09:17:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nininini

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 65900931 at 2011-03-31 23:18:09:
1.水+反应体系
2.DNase消化后的RNA+反应体系

对比一下看看。

对比了~~不加模板没有产物
赞一下 回复此楼
7楼2011-04-01 09:17:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nininini

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 郝钊 at 2011-04-01 00:16:28:
DNA酶消化过的RNA中如果存在可以退火的片段，一样可以P出条带来。

但P出的条带和目的条带完全吻合~~900多的片段
赞一下 回复此楼
8楼2011-04-01 09:19:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jasco

木虫 (正式写手)
★
nininini(金币+1):谢谢参与
基因组dna污染很难通过dnase完全去除的
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2011-04-01 09:22:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

65900931

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by nininini at 2011-04-01 09:17:47:
对比了~~不加模板没有产物

几个循环？基因组dna或多或少都会残留一点，如果是30个循环才有产物，应该影响不大。另外，还要看你的实验目的了。
赞一下 回复此楼
10楼2011-04-01 09:52:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nininini

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 65900931 at 2011-04-01 09:52:35:
几个循环？基因组dna或多或少都会残留一点，如果是30个循环才有产物，应该影响不大。另外，还要看你的实验目的了。

30个循环，是要做RNA定量的，所以希望基因组污染越小越好~
赞一下 回复此楼
11楼2011-04-01 15:35:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

65900931

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by nininini at 2011-04-01 15:35:45:
30个循环，是要做RNA定量的，所以希望基因组污染越小越好~

30个循环是一个极小值。你把阴性对照当background就好了。定量时扣除这部分数值。但是我想扣除不扣除都没区别，因为30个循环算出来应该是个趋近于0的数值。
赞一下 回复此楼
12楼2011-04-02 09:46:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

郝钊

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by nininini at 2011-04-01 09:19:23:
但P出的条带和目的条带完全吻合~~900多的片段

那可能的原因就是DNase消化不彻底
赞一下 回复此楼
13楼2011-04-03 10:50:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

阿修罗Axuro

金虫 (小有名气)
★
nininini(金币+1):谢谢参与
基本上DNAse是无法完全干掉DNA模板的。
赞一下(1人) 回复此楼
14楼2011-04-03 11:52:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 nininini 的主题更新
141/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 290调剂生物0860 +35 哇哈哈，。 2026-04-11 41/2050 2026-04-14 23:47 by Xurambo2014
[考研] 211本科材料化工求调剂 +19 YHLAH 2026-04-11 23/1150 2026-04-14 22:25 by fenglj492
[考研] 药学305求调剂 +6 玛卡巴卡boom 2026-04-11 6/300 2026-04-14 19:48 by zhouxiaoyu
[考研] 366求调剂 +11 不知名的小卅 2026-04-11 11/550 2026-04-14 15:50 by zs92450
[基金申请] RY：中国产出的科学垃圾论文，绝对数量和比例都世界第一 +6 zju2000 2026-04-14 17/850 2026-04-14 14:34 by jurkat.1640
[考研] 求调剂 +3 我爱高数高数爱� 2026-04-12 3/150 2026-04-14 01:00 by 王珺璞
[考研] 332求调剂 +15 蕉蕉123 2026-04-10 15/750 2026-04-13 23:12 by pies112
[考研] 一志愿211 0703化学 346分求调剂 +26 土豆er? 2026-04-09 29/1450 2026-04-13 15:15 by 独醉梦孤城
[考研] 一志愿085802 323分求调剂 +13 drizzle_9 2026-04-12 14/700 2026-04-13 10:26 by Faiz5552
[考研] 322求调剂，08工科 +4 今天是个小号 2026-04-08 4/200 2026-04-13 00:20 by baobaoye
[考研] 2本，初试303，0860求调剂 +6 floriea 2026-04-12 8/400 2026-04-12 18:13 by zhouxiaoyu
[考研] 求调剂 +16 张番茄不炒蛋 2026-04-10 17/850 2026-04-12 13:58 by 熬夜成！
[考研] 电气工程专硕320求调剂 +5 小麻子111 2026-04-10 5/250 2026-04-12 10:47 by zhouyuwinner
[考研] 求调剂，一志愿大连理工大学354分 +5 雨声余生 2026-04-11 6/300 2026-04-11 16:12 by 雨声余生
[考研] 中药学调剂 初试324 +4 洋甘菊、 2026-04-10 6/300 2026-04-11 09:41 by gong120082
[考研] 本科211 工科085400 280分求调剂 可跨专业 +11 LZH（等待调剂中 2026-04-10 11/550 2026-04-11 08:39 by zhq0425
[考研] 368求调剂 +3 17385968172 2026-04-10 3/150 2026-04-10 20:12 by 电子奥德彪
[考博] 博士自荐 +7 可可小胖 2026-04-08 7/350 2026-04-10 08:28 by kimhero
[考研] 070300化学 求调剂 +13 73372112 2026-04-08 13/650 2026-04-09 20:22 by maddjdld
[论文投稿] 求助文献原文 10+3 18500821399 2026-04-08 3/150 2026-04-09 16:56 by 北京莱茵润色
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭