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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 【求助/交流】BamHI酶切
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小小木虫8580

金虫 (小有名气)
酶失活也有可能
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21楼2011-03-29 13:06:27
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liulanhua

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by didillytao at 2011-03-29 08:56:58:
弱弱问一句,你确定你的质粒有BamH1位点吗,takara的酶用的还挺多的,除非是酶有降解或者质粒本身有问题吧,我们两个小时切得相当完全啊...

恩  得在确认下是不是质粒的问题
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努力会有收获！
22楼2011-03-29 16:14:38
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liulanhua

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by scienzyme at 2011-03-29 09:00:35:
两个小时BamHI肯定能切开的。我怀疑楼主的质粒有问题，没有BamHI的识别序列。

我现在开始怀疑质粒的问题了，不知道是不是突变，酶切位点丢失了。那我要是想做DNA测序的话整个质粒都需要测吗？还是可以选择某一片段测？
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努力会有收获！
23楼2011-04-04 15:24:10
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scienzyme

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by liulanhua at 2011-04-04 15:24:10:
我现在开始怀疑质粒的问题了，不知道是不是突变，酶切位点丢失了。那我要是想做DNA测序的话整个质粒都需要测吗？还是可以选择某一片段测？

你可以选择测含有BamHI位点的那个区域。
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24楼2011-04-04 17:31:01
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shaquila

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+1): 鼓励交流~~ 2011-04-04 19:43:15
发现宝生物的产品不是太稳定，貌似国内大的实验室都不大用它的产品，楼主可以问其他实验室借用下，或切个其他带这个位点的质粒，排除酶的问题，也测序下自己的质粒，两个原因都有。

[ Last edited by shaquila on 2011-4-4 at 18:00 ]
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25楼2011-04-04 17:56:05
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mazhenggen

铁虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
质粒杂质有点多，纯化一下在酶切
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我喜欢所以我做
26楼2011-04-05 13:11:33
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liulanhua

金虫 (正式写手)
恩 多谢指点
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努力会有收获！
27楼2011-04-05 15:46:34
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baoshiling

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
同时天涯沦落人啊，我最近也在做这个东东
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相信自己，怒放生命
28楼2013-06-28 22:46:47
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