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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 培养/筛选 » 【求助/交流】求教抗生素的有效时间
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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】求教抗生素的有效时间 已有6人参与

各位达人
我一直在做细菌的转化，双抗加目的基因。想请教下 抗生素平板放在37度培养箱中的有效时间大概有多长？ 用的是氨苄和氯霉素。因为我做的转化涂板，大约48小时的时候出现比较小的菌落，目测是我们的受体细胞，但是再次划线到抗生素平板上或者接入到液体培养基中就没有生长现象。
因此我怀疑是平板内的抗生素失效，而导致原来不能长起来的菌落也长起来了。 故 有次一问，希望有经验的前人不吝赐教！！
多谢！
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1楼 2011-03-23 08:10:42
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fywjp

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
对于涂板，板越薄长得会越慢，一般50ml铺四个，14h足以长出比较适中的菌落了，你长了48h，还是小菌落，说明不是阳性菌
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5楼2011-03-23 18:11:38
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meizishu

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
2楼2011-03-23 09:04:49
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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)
有没有常做克隆的高手进来指点一下 ？？？
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3楼2011-03-23 09:57:25
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
48小时菌落还很小，基本可以不用往后做了。
按照经验，控制在16 h内吧，多抗的板可能要比单抗要长了慢点，但是我用的三抗还是能在20 h内长出较大的菌落的。
PS：多质粒同时转化如果效果不佳的话，可以尝试分步转，即转一个质粒后，做感受态再转第二个质粒。
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Thank-you，so-blue.
4楼2011-03-23 09:57:37
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