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roxxane

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】求助,急!反向northern印迹杂交总失败

用cDNA一链做的探针,浓度大概1800ng/ul。
样品点在膜上,上样量1ul
10ml的杂交液,加1ul探针,42度杂交过夜
洗了膜之后加CDP-Start压片
整个膜都亮,要么就是斑驳的亮,看不到样品的信号
是我探针浓度太高了吗,还是杂交时间太长,一般在15个小时左右
非特异性结合那么严重,还是洗膜不够干净呢

请大虾们帮帮我吧

[ Last edited by roxxane on 2011-3-16 at 18:40 ]
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